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法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽的筛选及鉴定
引用本文:王臣,郭香玲,李小康,汪洋,张春杰,吴庭才,李德元,陈溥言.法氏囊活性五肽BP5特异性结合肽的筛选及鉴定[J].中国预防兽医学报,2014,36(12).
作者姓名:王臣  郭香玲  李小康  汪洋  张春杰  吴庭才  李德元  陈溥言
作者单位:1. 河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室,河南洛阳,471003
2. 南京农业大学农业部动物细菌学重点实验室,江苏南京,210095
基金项目:国家自然科学青年基金项目,河南省高校青年骨干教师项目
摘    要:为鉴定与具有免疫调节功能和抗肿瘤潜能的法氏囊活性五肽(BP5)特异性结合的多肽,本研究利用噬菌体展示技术,以BP5-BSA为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行4轮亲和筛选,结合ELISA鉴定和竞争抑制试验,筛选出3个能够特异性与BP5结合的噬菌体阳性克隆.测序结果显示,其编码的12肽序列分别为:PINMQTLNCMAA(P2-12)、GCTLNPMSDLLG(P6-12)和MSSTLNGMLNSL(P7-12),其核心基序为TLNXM.通过人工合成P2-12、P6-12、P7-12多肽,并采用MTT法检测其对BP5抗肿瘤细胞增殖能力的影响,结果显示,P2-12和P7-12肽在0.2 μg/mL~20 μg/mL浓度下,P6-12肽在2μg/mL~20 μg/mL浓度下均能够抑制BP5抗小鼠WEHI-231 B淋巴瘤细胞增殖作用,其中P2-12在20 μg/mL浓度下抑制作用最为显著(p<0.01).此外,p53荧光素酶活性检测结果显示,这3种BP5结合肽在实验浓度下均能够下调BP5促p53基因转录的活性.以上结果表明,这3种BP5特异性结合肽具有下调BP5抗肿瘤活性.本研究为进一步研究BP5抗肿瘤细胞增殖作用的机制提供了相关的实验依据.

关 键 词:法氏囊  活性五肽  噬菌体随机肽库  抗肿瘤  结合肽

Screening and identification of specific binding peptides to Bursopentin by phage display peptide library
Abstract:
Keywords:bursa of Fabricius  Bursopentin  phage-displayed random peptide library  anti-tumor  binding peptides
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