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检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用
引用本文:汪招雄,何启盖,刘丽娜,刘正飞,黄红亮,陈焕春.检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用[J].中国预防兽医学报,2006,28(2):220-225.
作者姓名:汪招雄  何启盖  刘丽娜  刘正飞  黄红亮  陈焕春
作者单位:华中农业大学,动物医学院,预防兽医学湖北省重点实验室,农业微生物学国家重点实验室,湖北,武汉,430070
基金项目:国家重大科技攻关专项基金
摘    要:以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrV IgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏度达15.6ng(0.156μg/mL),与乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪流感病毒(SIV)等无交叉反应。批间和批内变异系数较小,分别为6.39%和4.1%。应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测,肺和脑PrV抗原检出率最高,其次是脾、心、肝和肌肉。应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测,发现二者的符合率可达到77.4%,比PCR敏感。实验结果表明:双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可广泛应用于动物组织中PrV的检测。

关 键 词:双抗体夹心间接ELISA  单克隆抗体  猪伪狂犬病毒Ea株
文章编号:1008-0589(2006)02-0220-06
收稿时间:2004-10-27
修稿时间:2004年10月27

Development of double-antibody sandwich indirect ELISA to detect pseudorabies virus
WANG Zhao-xiong,HE Qi-gai,LIU Li-na,LIU Zheng-fei,HUANG Hong-liang,CHEN Huan-chun.Development of double-antibody sandwich indirect ELISA to detect pseudorabies virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2006,28(2):220-225.
Authors:WANG Zhao-xiong  HE Qi-gai  LIU Li-na  LIU Zheng-fei  HUANG Hong-liang  CHEN Huan-chun
Abstract:
Keywords:double-antibody sandwich indirect ELISA  monoclonal antibody  pseudorabies virus Ea strain
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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