| 猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的克隆与序列分析 |
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| 引用本文： | 娄高明,杜伟贤,魏平华,宋长绪,杨傲冰,周秀蓉,张春红,谢明权.猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的克隆与序列分析[J].中国预防兽医学报,2001,23(5):377-381. |
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| 作者姓名： | 娄高明 杜伟贤 魏平华 宋长绪 杨傲冰 周秀蓉 张春红 谢明权 |
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| 作者单位： | 娄高明（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640）;杜伟贤（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640）;魏平华（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640）;宋长绪（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640）;杨傲冰（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640）;周秀蓉（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640）;张春红（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640）;谢明权（广东省兽医生物技术重点实验室,广东,广州,510640） |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金重大项目(No963007);广东省科技攻关项目(No.99B05601G);广东省农科院院长基金项目(No96-基金-10) |
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| 摘 要： | 本研究根据口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因的序列，设计并合成了1对用于扩增整个VP1基因的引物（5P、P6）。从细胞培养液或组织中提取总RNA，通过PT－PCR扩增，从F29株O3I3株和T509株中均获得了1条约740bp的DNA电泳带。将PCR产物双酶切后电泳回收，插入到相应双酶切的pUC18质粒中，获得了重质粒。通过PCR鉴定，证明重组质粒pUCVP1/F29,pUCVP1/0313,pUCVP1/T509均插入了VP1基因。对上述3个重线质粒进行测序后分析，F29强毒株与O313、T509弱毒株相比，其核苷酸序列同源性分别为98．75％和99．06％；因F29株核苷酸发生3个碱基缺失与1个碱基替换，故推导的氨基酸序列同源性分别仅为44．13％和41．32％，而T509和O3I3株相比，其核苷酸、氨基酸序列同源性分别为99．37％和95．31％。通过序列分析发现，本研究的3个毒株与国内大多数毒株（包括1997年台湾暴发FMDV所分离的毒株，除O／A／58株外）均属同一基因型，核苷酸序列同源性为85％－94％；而与国外毒株相比，属不同的基因型，核苷酸序列同源性仅为81％－82％，其推本研究的3个毒株与国内分离的大多数毒株的VP1基因的氨基酸序列同源性高达87％－95％，本项研究对猪O型FMDV的强弱毒株VP基历进行克隆与序列分析，将进一步丰富我国FMDV毒株VP1基因资料库，为更加科学地防制FMD提供分子水平依据。
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| 关 键 词： | O型口蹄疫病毒 VP1基因 基因克隆 序列测定 猪 强毒株 弱毒株 |
| 文章编号： | 1008-0589(2001)05-0377-05 |
| 修稿时间： | 2000年12月13 |
Cloning and Sequence Analysis of the VP1 Gene of Virulence and Vaccine
Strains of Foot-and-mouth Disease Virus Type O in Swine |
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