| 基于丝状支原体丝状亚种P35反应原性的验证及其间接ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 闫磊,潘巧,赵雅芝,郝文君,李媛,辛九庆.基于丝状支原体丝状亚种P35反应原性的验证及其间接ELISA方法的建立[J].中国预防兽医学报,2019(7):716-720. |
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| 作者姓名： | 闫磊 潘巧 赵雅芝 郝文君 李媛 辛九庆 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学动物科技学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队 |
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| 基金项目： | 牛羊重要疫病诊断与检测新技术研究项目基金(2016YFD0500900) |
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| 摘 要： | 为建立检测丝状支原体丝状亚种(Mmm)的间接ELISA方法,本研究利用生物信息学软件对Mmm的全基因组序列进行了分析,选定大小为540bp的0584基因,该基因是编码分子量为35ku的脂蛋白,并对其免疫反应原性进行研究。利用原核表达系统获得了0584基因的重组蛋白rP35,以牛传染性胸膜肺炎(CBPP)阳性血清为一抗进行western blot分析,试验结果为阴性,但Dot-blot试验结果为阳性,证明该蛋白可能是Mmm特有的一种构象依赖性免疫相关蛋白且具有反应原性。以rP35蛋白为包被抗原,通过反应条件优化初步建立了检测CBPP血清抗体的间接ELISA方法,特异性为88.0%,敏感性为89.8%,批内和批间变异系数均小于10%,与商品化试剂盒符合率为84.8%。本研究为研制CBPP血清检测试剂盒提供了一种候选蛋白。
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| 关 键 词： | 牛传染性胸膜肺炎 丝状支原体丝状亚种 间接ELISA |
Validation of reactogenicity of Mycoplasma mycoides subsp Mycoides P35 and establishment of indirect ELISA method |
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| YAN Lei,PAN Qiao,ZHAO Ya-zhi,HAO Wen-jun,LI Yuan,XIN Jiu-qing.Validation of reactogenicity of Mycoplasma mycoides subsp Mycoides P35 and establishment of indirect ELISA method[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(7):716-720. |
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| Authors: | YAN Lei PAN Qiao ZHAO Ya-zhi HAO Wen-jun LI Yuan XIN Jiu-qing |
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| Institution: | (College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;Innovation team of Animal Mycoplasma Disease,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Science,Harbin 150069,China) |
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| Abstract: | YAN Lei;PAN Qiao;ZHAO Ya-zhi;HAO Wen-jun;LI Yuan;XIN Jiu-qing(College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;Innovation team of Animal Mycoplasma Disease,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Science,Harbin 150069,China) |
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| Keywords: | Contagious bovine pleuropneumonia Mycoplasma mycoides subsp Mycoides indirect ELISA |
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