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口蹄疫病毒VP1-3免疫表位基因与猪γ-干扰素基因的融合表达
引用本文:姚清侠,钱平,曹毅,郭东春,徐卓菲,何雁南,司有辉,陈焕春.口蹄疫病毒VP1-3免疫表位基因与猪γ-干扰素基因的融合表达[J].中国预防兽医学报,2007,29(5):346-349,358.
作者姓名:姚清侠  钱平  曹毅  郭东春  徐卓菲  何雁南  司有辉  陈焕春
作者单位:华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室,湖北,武汉,430070
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);湖北省科技攻关项目
摘    要:将人工合成的口蹄疫病毒VP1-3上的抗原表位基因和猪γ-干扰素基因串联入原核表达载体pGEX-KG中,经酶切鉴定及测序表明重组载体中二者以接头融合的形式构建成重组表达质粒。将该质粒转化BL21后经IPTG诱导,实现了重组融合蛋白的高效表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析,重组蛋白分子量约为66 Ku,与预期大小相符。薄层扫描分析显示表达的重组蛋白占菌体总蛋白的37.4%,且主要以包涵体的形式存在。包涵体以SKL变性后,经PEG4000、氧化型谷胱苷肽和还原型谷胱苷肽复性。粗提产物以CPE_(50)测得重组蛋白在MDBK细胞上的抗水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)的活性达到1600 U/mL,说明表达产物具有干扰素的生物学活性,为下一步基因工程疫苗的研究奠定了基础。

关 键 词:口蹄疫病毒  抗原表位  猪γ-干扰素  融合表达
文章编号:1008-0589(2007)05-0346-04
收稿时间:2006-08-07
修稿时间:2006年8月7日

Fusion expression of immunological epitopes from VP1-3 of foot-and-mouth disease virus with porcine interferon-gamma
YAO Qing-xia,QIAN Ping,CAO Yi,GUO Dong-chun,XU Zhuo-fei,HE Yan-nan,SI You-hui,CHEN Huan-chun.Fusion expression of immunological epitopes from VP1-3 of foot-and-mouth disease virus with porcine interferon-gamma[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2007,29(5):346-349,358.
Authors:YAO Qing-xia  QIAN Ping  CAO Yi  GUO Dong-chun  XU Zhuo-fei  HE Yan-nan  SI You-hui  CHEN Huan-chun
Abstract:
Keywords:
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