| 基于Red同源重组和高效自杀性载体系统构建肠炎沙门氏菌突变株方法的比较 |
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| 引用本文： | 朱春红,孙晓庆,何素芬,朱国强.基于Red同源重组和高效自杀性载体系统构建肠炎沙门氏菌突变株方法的比较[J].中国预防兽医学报,2009,31(2). |
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| 作者姓名： | 朱春红 孙晓庆 何素芬 朱国强 |
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| 作者单位： | 扬州大学兽医学院,江苏,扬州,225009 |
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| 摘 要： | Red同源重组系统和高效自杀性载体系统都能对革兰氏阴性茵染色体直接进行修饰,本试验利用上述2种系统敲除不同来源肠炎沙门氏茵菌株SEF14茵毛操纵子亚单位sefD或sefA基因,并对构建肠炎沙门氏茵突变株方法进行比较.本研究成功构建了国际、国内标准株,鸡源和人源国内分离株sefD和sefA缺失株各4株.Red同源重组系统中能将PCR产物一步法直接转化肠炎沙门氏茵,通过同源重组序列发生同源重组交换.但对PCR产物和感受态细胞的质量要求很高,一次重组效率很低,而二次重组过程则相对简单、高效.自杀性载体系统若将构建好的合同源DNA片段的重组质粒转化宿主茵,其一次重组效率高,二次重组也只需蔗糖筛选传代丢失抗性质粒.Red同源重组系统将在染色体中残留FRT位点;而自杀性栽体系统在染色体中可不留任何痕迹.所以2个系统都能对不同源肠炎沙门氏茵染色体进行直接修饰,而且易删除抗性选择标志,与传统的高效自杀性载体系统比较,Red同源重组系统更方便快捷,省时省力.
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| 关 键 词： | 肠炎沙门氏茵 同源重组 SEF14茵毛 |
Comparison of two methods for constructing Salmonella enteritidis mutants:Red recombination system and suicide vector system |
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| ZHU Chun-hong,SUN Xiao-qing,HE Su-fen,ZHU Guo-qiang.Comparison of two methods for constructing Salmonella enteritidis mutants:Red recombination system and suicide vector system[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(2). |
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| Authors: | ZHU Chun-hong SUN Xiao-qing HE Su-fen ZHU Guo-qiang |
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| Keywords: | sefA setD |
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