| 刺激隐核虫LAMP检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王国良,周旻曦,徐益军.刺激隐核虫LAMP检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(7). |
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| 作者姓名： | 王国良 周旻曦 徐益军 |
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| 作者单位： | 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室,浙江宁波,315211 |
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| 基金项目： | 长江学者和创新团队发展计划，农业部公益性行业科研专项 |
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| 摘 要： | 为提高大黄鱼刺激隐核虫病的病原体检出率,本研究针对刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans) 18S-ITS2基因序列设计4条LAMP引物,在内外引物浓度比2∶1～6∶1、Mg2+浓度2 mmol/L、反应温度61℃～66℃、反应时间60 min的优化条件下,扩增产物经电泳后呈现特异性的LAMP梯形条带.本研究建立的LAMP方法具有高灵敏度(10-7 ng/μL DNA浓度),比常规PCR方法高100倍.将该方法应用于采集自不同地域的虫体样本、病鱼和水样以及不同组织样品的检测,结果在13份样品中有10份检出阳性,并显示该方法既能够检测发病鱼,也能够检出已感染但未发病的鱼.实验表明,该方法是一种能够快速、简易、特异、敏感地检测海水鱼类刺激隐核虫病的病原学检测方法.
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| 关 键 词： | 刺激隐核虫 18S-ITS2基因序列 环介导恒温基因扩增检测法 |
Establishment of the loop-mediated isothermal amplification for the detection of Cryptocaryon irritans |
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| WANG Guo-liang
,
ZHOU Min-xi
,
XU Yi-jun.Establishment of the loop-mediated isothermal amplification for the detection of Cryptocaryon irritans[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(7). |
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| Authors: | WANG Guo-liang ZHOU Min-xi XU Yi-jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cryptocaryon irritans 18S-ITS2 gene LAMP method |
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