猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6基因在比赤酵母中的表达 |
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引用本文: | 钱平.猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6基因在比赤酵母中的表达[J].中国预防兽医学报,2002,24(3):161-162. |
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作者姓名: | 钱平 |
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摘 要: | 根据酵母表达系统的密码子偏爱性、poly(A)信号以及外源基因mRNA5′端的二级结构等特性,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF6基因进行简并改造和人工合成,然后以正确的读码框架插和到分泌型母高效表达载体pPICZαA的α因子信号肽编码序列3′端,构建成酵母转移载体,用化学方法转化酵母菌GS115,和酶切鉴定证实,目的基因已整合到重组酵母菌染色体中。对重组酵母进行诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blot分析筛选,获得了一株高效表达目的蛋白的重组酵母菌,该重蛋白有免疫学活性,其表达水平可达2.0g/L,而未经改造的ORF6基因则不表达。
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关 键 词: | 猪 繁殖能力 呼吸综合征 病毒 ORF6基因 毕赤酵母 基因表达 |
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