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表达绿色荧光蛋白重组狂犬病病毒Flury-LEP的构建及其用于中和抗体检测的研究
引用本文:华涛,陶丽红,葛金英,王喜军,沈向真,步志高.表达绿色荧光蛋白重组狂犬病病毒Flury-LEP的构建及其用于中和抗体检测的研究[J].中国预防兽医学报,2010,32(8).
作者姓名:华涛  陶丽红  葛金英  王喜军  沈向真  步志高
作者单位:1. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开发实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开发实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095
摘    要:为确定狂犬病病毒(RV)Flury-LEP株外源基因的插入位点及其中和抗体快速检测方法,本研究在建立了RVFlury-LEP株反向遗传操作系统的基础上,构建了表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的重组LEP基因组cDNA克隆pCI-LEP-EGFP,并成功拯救出重组病毒(rLEP-EGFP)。rLEP-EGFP的生物学特性和野生型LEP(wtLEP)在NA细胞和BHK-21细胞中的生长动力学及对小鼠的致病性没有显著差异。rLEP-EGFP在BHK-21细胞中连续传代9次,各代次重组病毒均稳定表达EGFP。重组表达的EGFP可用于中和抗体检测,rLEP-EGFP免疫犬血清经间接免疫荧光(IFA)或荧光下直接观察检测RV中和抗体滴度,两种检测结果显示较好的相似性(p0.05)。本研究为研制以Flury-LEP株活载体多价疫苗奠定了基础,并为病毒中和抗体的检测提供了更为快捷的新方法。

关 键 词:狂犬病病毒  Flury-LEP株  反向遗传操作  多价疫苗  病毒中和抗体

Construction of a recombinant rabies virus expressing enhanced green fluorescent protein for the detection of virus neutralization antibodies
HUA Tao,TAO Li-hong,GE Jin-ying,WANG Xi-jun,SHEN Xiang-zhen,BU Zhi-gao.Construction of a recombinant rabies virus expressing enhanced green fluorescent protein for the detection of virus neutralization antibodies[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(8).
Authors:HUA Tao  TAO Li-hong  GE Jin-ying  WANG Xi-jun  SHEN Xiang-zhen  BU Zhi-gao
Abstract:
Keywords:EGFP
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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