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捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立及应用
引用本文:刘杉杉,赵亚荣,胡峰,吕超超,胡泉博,王贵华,崔尚金.捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国预防兽医学报,2011,33(9).
作者姓名:刘杉杉  赵亚荣  胡峰  吕超超  胡泉博  王贵华  崔尚金
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001
2. 大北农动物医学研究中心,北京,100097
基金项目:国家自然基金(31001069); 兽医生物技术国家重点实验室自主课题项目(NKLVBP2001002); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2009ZJKJ01)
摘    要:为建立同时检测猪捷申病毒(PTV)、猪瘟病毒(csFv)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRSV)的多重RT-PCR (mRT-PCR)检测方法,本研究以PRRSV ORF6基因、CSFV Ems基因和PTV 5'-UTR基因为对象,建立检测3种病毒的mRT-PCR方法.特异性试验表明,该方法可以特异扩增3种病毒的基因,对大肠杆菌、猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒和猪流感病毒呈阴性反应;敏感性试验表明,PRRSV、CSFV和PTV的最低核酸检出量分别为7.11×102拷贝、7.81×103拷贝和8.43×102拷贝,略低于单一RT-PCR敏感性;应用该方法对69份送检样品进行检测,其中PRRSV、CSFV和PTV单纯感染检出率分别为28.99%、27.54%和56.52%,PRRSV和CSFV混合感染检出率为4.35%,PRRSV和PTV的混合感染检出率为11.59%,CSFV和PTV的混合感染检出率为13.04%,3种病毒的混合感染检出率为8.70%,与单一RT-PCR检测结果符合率为98.6%.本研究建立的检测方法快速简便,可以用于疾病的初步筛选,对临床早期诊断和流行病学调查具有重要意义.

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  猪瘟病毒  猪捷申病毒  mRT-PCR

Establishment of the mutiplex RT-PCR detecting of Porcine teschovirus, Classical swine fever virus and Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
LIU Shan-shan,ZHAO Ya-rong,HU Feng,LV Chao-chao,HU Quan-bo,WANG Gui-hua,CUI Shang-jin.Establishment of the mutiplex RT-PCR detecting of Porcine teschovirus, Classical swine fever virus and Porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2011,33(9).
Authors:LIU Shan-shan  ZHAO Ya-rong  HU Feng  LV Chao-chao  HU Quan-bo  WANG Gui-hua  CUI Shang-jin
Institution:LIU Shan-shan1,ZHAO Ya-rong2,HU Feng1,LV Chao-chao2,HU Quan-bo1,WANG Gui-hua2,CUI Shang-jin1(1.Division of Swine Infectious Disease,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China,2.Dabeinong Resaerch Center of Veterinary Medicine,Beijing 100097,China)
Abstract:
Keywords:Porcine reproductive and respiratory syndrome virus  Classical swine fever virus  Porcine teschovirus  mRT-PCR  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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