| 胸膜肺炎放线杆菌荧光抗体检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王贵平,刘军发,陈剑锋,何启盖,刘正飞,陈焕春,吴斌,周锐.胸膜肺炎放线杆菌荧光抗体检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2008,30(12). |
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| 作者姓名： | 王贵平 刘军发 陈剑锋 何启盖 刘正飞 陈焕春 吴斌 周锐 |
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| 作者单位： | 1. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉430070;湖南农业大学动物医学学院,湖南长沙410128
2. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，湖北省科技攻关计划，国家生猪现代产业技术体系项目 |
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| 摘 要： | 将表达的胸膜肺炎放线杆菌（APP）外膜脂蛋白（OmlA）纯化后免疫新西兰白兔，收集高免血清作为一抗，建立了间接荧光抗体检测方法（IFA）。同时用提纯IgG标记FITC，作为荧光抗体，建立了直接荧光抗体检测方法（FA）。这2种检测方法对血清1型～12型APP标准株检测结果均为阳性，而血清13型和15型APP标准株、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血性波氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏茵、葡萄球菌和链球菌等其它相关细菌的检测结果均为阴性。IFA和FA对APP的最小检出浓度分别为5．32×10^4CFU／mL和4．17×10^5CFU／mL。TFA和FA对人工感染动物和139份临床送检病料进行检测，并与细菌学检测结果和apxlV-PCR进行比较。其中，上述4种方法检测实验感染动物样品结果均为阳性，有较好的符合率；临床可疑病料中，有36份（25．90％1为IFA阳性，29份（20．86％）为FA阳性，42份（30．22％）为PCR阳性，从7份（5．03％）病料中分离到本病原。这些初步研究结果表明，所建立的荧光抗体检测方法可以应用于APP感染的检测，在检出率方面优于细菌分离鉴定方法。
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| 关 键 词： | 胸膜肺炎放线杆菌 外膜脂蛋白 荧光抗体 |
Development of species-specific immunofluorescence assay to detect Actinobacillus pleuopneumoniae |
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| WANG Gui-ping,LIU Jun-fa,CHEN Jian-feng,HE Qi-gai,LIU Zheng-fei,CHEN Huan-chun,WU Bin,ZHOU Ru.Development of species-specific immunofluorescence assay to detect Actinobacillus pleuopneumoniae[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(12). |
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| Authors: | WANG Gui-ping LIU Jun-fa CHEN Jian-feng HE Qi-gai LIU Zheng-fei CHEN Huan-chun WU Bin ZHOU Ru |
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