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猪链球菌2型表面蛋白sp融合基因的构建与高效表达
引用本文:刘燕,刘军,冯书章,郭学军,孙洋,祝令伟.猪链球菌2型表面蛋白sp融合基因的构建与高效表达[J].中国预防兽医学报,2007,29(7):492-495.
作者姓名:刘燕  刘军  冯书章  郭学军  孙洋  祝令伟
作者单位:1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062
2. 军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:利用PCR方法从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sp基因,克隆到pMD18-T载体中,构建出克隆载体pMD18T-sp。以SalⅠ和BamHⅠ从pMD18T-sp中切下目的sp基因片段并克隆到质粒pMAL-p2X中,构建重组表达质粒pMALp2X-sp,转化宿主菌TB1中进行诱导表达。分析表明sp基因序列比GenBank报道序列AY864331少了270 bp;SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了136 Ku左右的目的蛋白MBP-Sao,目的蛋白为可溶表达,约占菌体蛋白总量的12.3%。表达的蛋白可用Amylose树脂纯化。将纯化的融合蛋白MBP-Sao免疫家兔,所得抗血清经ELISA检测,结果显示融合蛋白MBP-Sao包板抗体效价达1:16 000,且与猪链球菌2型和9型呈阳性反应,而与沙门氏杆菌及巴氏杆菌呈阴性反应。本试验对猪链球菌2型表面蛋白Sao的高效表达及其免疫原性进行了初步研究,为进一步研究猪链球菌2型表面蛋白Sao的结构和功能奠定了基础。

关 键 词:猪链球菌2型  表面蛋白  sp基因  融合表达
文章编号:1008-0589(2007)07-0492-04
修稿时间:2006-09-27

Construction and expression of sp fusion gene of Streptococcus suis serotype 2
LIU Yan,LIU Jun,FENG Shu-zhang,GUO Xue-jun,SUN Yang,ZHU Ling-wei.Construction and expression of sp fusion gene of Streptococcus suis serotype 2[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2007,29(7):492-495.
Authors:LIU Yan  LIU Jun  FENG Shu-zhang  GUO Xue-jun  SUN Yang  ZHU Ling-wei
Institution:1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China; 2. Military Veterinary Institute, Academy of Military Medicine, Changchun 130062, China
Abstract:
Keywords:Streptococcus suis serotype 2  surface protein  sp gene  fusing expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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