| 猪轮状病毒OSU强毒株vp7基因的克隆及其抗原表位原核表达和免疫学活性分析 |
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| 引用本文： | 时洪艳,冯力,陈建飞,孙东波,吴波平.猪轮状病毒OSU强毒株vp7基因的克隆及其抗原表位原核表达和免疫学活性分析[J].中国预防兽医学报,2008,30(2):136-140. |
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| 作者姓名： | 时洪艳 冯力 陈建飞 孙东波 吴波平 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,猪传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,猪传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 摘 要： | 参照GenBank中所收录的猪轮状病毒OSU株序列设计了一对特异性引物，RT—PCR扩增出1062bp的vp7全长基因，与参考OSU序列的核苷酸同源性达99．8％，克隆到pMD18-T载体中，获得pMD18-T—vp7阳性质粒。以阳性质粒为模板，利用引入BamH Ⅰ和XhoⅠ酶切位点的引物进行PCR扩增得到含有vP7中和抗原表位区域639bp的基因片段，定向克隆到表达载体pGEX-6P—1中，经酶切PCR鉴定的阳性质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG（终浓度为1．0mmol／mL）37℃诱导4h后，SDS—PAGE电泳显示表达了大小约50ku带GST标签的融合蛋白，薄层扫描显示蛋白表达融合量占菌体总蛋白的33．2％。Westernblot分析表明该VP7重组蛋白可与PRV阳性血清特异性反应。
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| 关 键 词： | 猪轮状病毒 vp7基因 克隆 原核表达 病毒 强毒株 基因片段 定向克隆 抗原表位 原核表达 免疫学 活性分析 strain rotavirus porcine region gene expression 特异性反应 阳性血清 重组蛋白 分析表 Western blot |
| 文章编号： | 1008-0589（2008）02-0036-05 |
| 收稿时间： | 2007-07-12 |
| 修稿时间： | 2007年7月12日 |
Cloning and expression of the vp7 gene antigenic region of porcine rotavirus OSU virulent strain |
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| SHI Hong-yan,FENG Li,CHEN Jian-fei,SUN Dong-bo,WU Bo-ping.Cloning and expression of the vp7 gene antigenic region of porcine rotavirus OSU virulent strain[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(2):136-140. |
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| Authors: | SHI Hong-yan FENG Li CHEN Jian-fei SUN Dong-bo WU Bo-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine rotavirus vp7 gene clone prokaryotic expression |
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