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牛病毒性腹泻病病毒Changchun184株E2基因的克隆及在大肠杆中的高效表达
引用本文:徐兴然,涂长春,余兴龙,肖昌,张青婵,张丽颖,查云峰,史子学.牛病毒性腹泻病病毒Changchun184株E2基因的克隆及在大肠杆中的高效表达[J].中国预防兽医学报,2005,27(2):98-101.
作者姓名:徐兴然  涂长春  余兴龙  肖昌  张青婵  张丽颖  查云峰  史子学
作者单位:1. 军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;西南农业大学,重庆,北碚,400716
2. 军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:根据GenBank已发表的多个BVDV-1序列的比较分析结果设计引物,应用RT-PCR及套式PCR克隆得到包含Changchun184(CC-184)株E2基因的片段F2/R2,克隆、测序分析结果表明该片段大小为1391bp,软件分析结果表明CC-184株E2基因长度为1122bp(GenBank accession number:AF526380).通过基因操作构建得到表达完整E2蛋白和去除E2蛋白C-端疏水区的重组质粒pET28a-BE2和pET28a-BE2m,转化大肠杆菌并诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明重组菌能表达目的蛋白,其表达量分别占菌体总蛋白的6.25%和35.7%.Western blot分析结果正实表达蛋白为CC-184株E2蛋白.

关 键 词:牛病毒性腹泻病病毒  E2基因  克隆  表达
文章编号:1008-0589(2005)02-0098-04

Cloning of the E2 gene of bovine virol diarrhea virus strain of Changchun184 and its expression in Escherichia coli
XU Xing-ran,TU Chang-Chun,YU Xing-long,XIAO Chang,ZHANG Qing-chan,ZHANG Li-ying,ZHA Yun-feng,SHI Zi-xue.Cloning of the E2 gene of bovine virol diarrhea virus strain of Changchun184 and its expression in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2005,27(2):98-101.
Authors:XU Xing-ran  TU Chang-Chun  YU Xing-long  XIAO Chang  ZHANG Qing-chan  ZHANG Li-ying  ZHA Yun-feng  SHI Zi-xue
Abstract:
Keywords:bovine viral diarrhea virus  E2 gene  clone  expression
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