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牛支原体双重PCR检测方法的建立
引用本文:刘洋,李媛,董惠,张美晶,姜海芳,陈维,辛九庆.牛支原体双重PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2010,32(8).
作者姓名:刘洋  李媛  董惠  张美晶  姜海芳  陈维  辛九庆
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室/国家牛传染性胸膜肺炎指定检测实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150001
基金项目:兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费 
摘    要:为鉴别牛支原体(Mycoplasma bovis)与丝状支原体丝状亚种SC(M.mycoides subsp.mycoides SC),本实验通过优化M.bovis特异性引物pMB81-1/pMB81-2s和MmmSC特异性引物SC1/SC2的退火温度,建立了鉴别M.bovis和MmmSC的双重PCR检测方法。该方法能够分别由M.bovis和MmmSC扩增得到528bp和270bp片段。敏感性试验结果显示该方法检测M.bovis和MmmSC培养物的最低浓度分别为106cfu/mL和105cfu/mL。特异性试验结果显示,该方法对无乳支原体代表株PG2、丝状支原体丝状亚种LC型代表株Y-goat、山羊支原体山羊肺炎亚种Mccp、绵羊支原体Y-98、猪鼻支原体BST-7、巴氏杆菌以及结核分枝杆菌扩增结果均为阴性。应用该方法对临床病料的检测结果与培养鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于临床检测。

关 键 词:牛支原体  丝状支原体丝状亚种SC  双重PCR

Establishment of a duplex-PCR assay for detecttion of Mycoplasma bovis
LIU Yang,LI Yuan,DONG Hui,ZHANG Mei-jing,JIANG Hai-fang,CHEN Wei,XIN Jiu-qing.Establishment of a duplex-PCR assay for detecttion of Mycoplasma bovis[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(8).
Authors:LIU Yang  LI Yuan  DONG Hui  ZHANG Mei-jing  JIANG Hai-fang  CHEN Wei  XIN Jiu-qing
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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