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共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因和猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒的构建及其在小鼠模型上的免疫原性分析
引用本文:李宏宇,孙元,常天明,贺番,黄俊华,仇华吉.共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因和猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒的构建及其在小鼠模型上的免疫原性分析[J].中国预防兽医学报,2010,32(3).
作者姓名:李宏宇  孙元  常天明  贺番  黄俊华  仇华吉
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨150001;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018
摘    要:本研究旨在以复制缺陷型人5型腺病毒为载体,构建一株同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株GP5蛋白和猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的重组腺病毒疫苗。首先利用重叠PCR将GP5和E2基因通过口蹄疫病毒(FMDV)2A序列连接,形成一个完整的ORF,并将其克隆到腺病毒穿梭载体中,通过细菌内同源重组构建共表达PRRSVGP5蛋白和CSFVE2蛋白的重组腺病毒(rAdV-GP52AE2)。间接免疫荧光试验和western blot检测证实2个外源基因均获得表达。在小鼠上进行的免疫效力评价结果显示,rAdV-GP52AE2免疫组针对CSFV的中和抗体滴度可达1∶128,针对PRRSV的中和抗体滴度为1∶16;在淋巴细胞增殖试验中,免疫组与阴性对照组在增殖指数上有显著差异,表明该重组腺病毒可以同时诱导抗PRRSV和CSFV的特异性体液免疫和细胞免疫。这些结果显示,利用具有自动剪切功能的FMDV2A多肽构建的重组腺病毒有望开发成一种同时预防PRRS和CSF的新型载体疫苗。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  猪瘟病毒  重组腺病毒  免疫原性

Immunogenicity of a recombinant adenovirus co-expressing porcine reproduction and respiratory syndrome virus GP5 protein and classical swine fever virus E2 protein in mice
LI Hong-yu,SUN Yuan,CHANG Tian-ming,HE Fan,HUANG Jun-hua,QIU Hua-ji.Immunogenicity of a recombinant adenovirus co-expressing porcine reproduction and respiratory syndrome virus GP5 protein and classical swine fever virus E2 protein in mice[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(3).
Authors:LI Hong-yu  SUN Yuan  CHANG Tian-ming  HE Fan  HUANG Jun-hua  QIU Hua-ji
Institution:LI Hong-yu1,SUN Yuan1,CHANG Tian-ming1,HE Fan1,2,HUANG Jun-hua1,QIU Hua-ji1 (1. Division of Swine Infectious Diseases,National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China,2. College of Animal Science , Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Huhhot 010018,China)
Abstract:Classical swine fever (CSF) and porcine reproduction and respiratory syndrome (PRRS) are both economically important,highly contagious diseases worldwide. To develop an effective vaccine to control the two diseases,we constructed a recombinant adenovirus (rAdV-GP52AE2) using a replication-defective human adenovirus serotype 5 (HAd5) as a delivery vector,to co-express the GP5 protein of highly pathogenic porcine reproduction and respiratory syndrome virus (PRRSV) and the E2 protein of classical swine fever v...
Keywords:porcine reproductive and respiratory syndrome virus  classical swine fever virus  recombinant adcnovirus  immunogenicity
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