| 基于内部核糖体进入位点提高重组NDV表达IBDV VP2基因的研究 |
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| 引用本文： | 何金娇,刘雪莹,吴云舟,郭茉,韩晓辉,尹杰超,安莹,任桂萍,李德山.基于内部核糖体进入位点提高重组NDV表达IBDV VP2基因的研究[J].中国预防兽医学报,2013,35(6). |
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| 作者姓名： | 何金娇 刘雪莹 吴云舟 郭茉 韩晓辉 尹杰超 安莹 任桂萍 李德山 |
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| 作者单位： | 东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,黑龙江哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 黑龙江省成果产业化项目，黑龙江省发改委，东北农业大学博士启动基金 |
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| 摘 要： | 为提高重组新城疫病毒(NDV)外源基因表达量,本研究采用内部核糖体进入位点序列(IRES)构建表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV) HLJ07株VP2双拷贝基因的重组NDV(rClone30-VP2-IRES-VP2),同时构建表达单拷贝VP2基因的重组NDV (rClone30-VP2)作为对照.间接免疫荧光试验表明VP2蛋白在感染两种重组病毒的鸡胚成纤维细胞(DF-1)中得到表达.Real-time PCR检测结果表明rCIone30-VP2-IRES-VP2中VP2 mRNA转录水平明显高于rClone30-VP2.生长曲线分析表明,两株重组病毒株与亲本NDV LaSota (Clone30)株在细胞培养中可以同样稳定复制.重组病毒株在鸡胚中多次传代之后仍稳定表达VP2蛋白.本研究通过建立NDV的反向遗传操作系统构建了独立表达IBDV双拷贝VP2基因的重组NDV,并证明双拷贝基因的表达水平优于单拷贝基因,为提高重组NDV外源基因的表达量提供了新的思路.
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| 关 键 词： | 重组新城疫病毒 vvIBDV VP2基因 IRES |
An enhanced expression of vvIBDV VP2 gene in recombinant NDV by using IRES sequence |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant newcastle disease virus vvIBDV VP2 gene IRES |
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