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基因C型鸭甲肝病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立
引用本文:何美琳,张焕容,程方明,杨晓农,岳华.基因C型鸭甲肝病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2015(3):211-215.
作者姓名:何美琳  张焕容  程方明  杨晓农  岳华
作者单位:西南民族大学生命科学与技术学院;西南民族大学动物医学四川省高等学校重点实验室
基金项目:西南民族大学研究生创新型科研项目(CX2014SZ100);国家高技术研究发展计划(2012AA101304);西南民族大学研究生学位点建设项目(2014XWD-S0906)
摘    要:为建立检测基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)血清抗体的方法,本研究以纯化的DHAV-C作为包被抗原,抗DHAV-C单克隆抗体(MAb)5E3-9与待检血清竞争结合抗原,采用方阵法确定包被抗原、MAb及待检血清的最佳工作浓度,经过对反应条件的优化,建立了DHAV-C抗体的竞争ELISA检测方法。该方法仅对DHAV-C血清检测为阳性,与DHAV-A、鸭圆环病毒、鸭乙型肝炎病毒等相关病原的鸭阳性血清无交叉反应。敏感性试验表明,标准阳性血清1:128倍稀释时,检测结果仍为阳性,比中和试验灵敏性更高。批内批间变异系数分别为4.64%~5.21%和6.02%~8.68%,具有良好的重复性。与中和试验比较,阳性符合率为100%(15/15),阴性符合率为77.8%(14/18)。本研究基于纯化的DHAV-C及其特异性MAb建立的MAb竞争ELISA检测方法可以用于DHAV-C流行病学调查以及抗体的检测。

关 键 词:基因C型鸭甲肝病毒  单克隆抗体  竞争ELISA  抗体检测
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