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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒ORF1a、ORF1b、ORF2-ORF7片段互换嵌合病毒的构建及其生物学特性的分析
引用本文:姜一峰,周艳君,王亚欣,朱建平,徐彦召,童武,虞凌雪,童光志.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒ORF1a、ORF1b、ORF2-ORF7片段互换嵌合病毒的构建及其生物学特性的分析[J].中国预防兽医学报,2012,34(1):1-5.
作者姓名:姜一峰  周艳君  王亚欣  朱建平  徐彦召  童武  虞凌雪  童光志
作者单位:中国农业科学院上海兽医研究所猪病研究室,上海,200241
基金项目:国家自然科学基金(31100121);NSFC-广联合基金项目(U0931003);国家863计划项目(2011AA10A208);上海市2011年重点基础项目(09XD1405400);国际合作项目(2010DFB33920);中央科研院所公益性基础科研业务费项目(2011JB03)
摘    要:为研究高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)强弱毒之间毒力差异的分子基础,本实验分别以HP-PRRSV强毒HuN-F5株及其传代致弱的疫苗病毒株HuN4-F112为亲本病毒,利用反向遗传操作技术分别将ORF1a、ORF1b或ORF2-7编码序列在强弱毒之间互换。将6种含有不同嵌合基因的全长病毒基因组的重组质粒体外转录后转染BHK-21细胞,然后在Marc-145细胞中传代,拯救的重组病毒经RT-PCR、测序和免疫荧光鉴定,并分别命名为rHuN4-F5-ORF1a、rHuN4-F5-ORF1b、rHuN4-F5-ORF2-7(以强毒为骨架)和rHuN4-F112-ORF1a、rHuN4-F112-ORF1b、rHuN4-F112-ORF2-7(以弱毒为骨架)。进一步测定这些病毒在Marc-145上的生长曲线,结果显示:以强毒为骨架的嵌合病毒rHuN4-F5-ORF1a生长滴度显著高于亲本强毒rHuN4-F5,而以弱毒为骨架的嵌合病毒rHuN4-F112-ORF1a在细胞上的生长滴度低于其亲本弱毒rHuN4-F112,其他片段替换对病毒在细胞上的生长没有明显影响。本实验结果提示ORF1a对于PRRSV在体外细胞培养上的生长调节起重要作用。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  嵌合病毒  ORF1a  ORF1b  ORF2-7

Generation and biological characterization of chimeric viruses which substituted ORF1a,ORF1b,ORF2-7 between highly pathogenic porcine reproductive and respiratory virus and its attenuated vaccine virus
JIANG Yi-feng , ZHOU Yan-jun , WANG Ya-xin , ZHU Jian-ping , XU Yan-zhao , TONG Wu , YU Ling-xue , TONG Guang-zhi.Generation and biological characterization of chimeric viruses which substituted ORF1a,ORF1b,ORF2-7 between highly pathogenic porcine reproductive and respiratory virus and its attenuated vaccine virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2012,34(1):1-5.
Authors:JIANG Yi-feng  ZHOU Yan-jun  WANG Ya-xin  ZHU Jian-ping  XU Yan-zhao  TONG Wu  YU Ling-xue  TONG Guang-zhi
Institution:(Division of Swine Infectious Diseases,Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241,China)
Abstract:
Keywords:porcine reproductive and respiratory virus  chimera virus  ORF1a  ORF1b  ORF2-7
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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