猪腹泻相关病毒多重RT-PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 吴洋,杜彩虹,张博,唐丽杰,乔薪瑗,姜艳平,李一经.猪腹泻相关病毒多重RT-PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2014(5):376-378. |
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作者姓名: | 吴洋 杜彩虹 张博 唐丽杰 乔薪瑗 姜艳平 李一经 |
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作者单位: | 东北农业大学动物医学院 |
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基金项目: | “十二五”国家863计划(2012AA101304-3);黑龙江省教育厅项目(10543006) |
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摘 要: | 为建立同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRV)的多重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的PEDV S基因、TGEV S基因和PRV VP6基因序列设计合成引物,利用这3对引物对同一样品中的PEDV、TGEV、PRV进行多重RT-PCR扩增,结果显示,该方法可以同时扩增PEDV(682 bp)、TGEV(480 bp)和PRV(297 bp)的特异性DNA片段,而对猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的PCR扩增结果均为阴性;敏感性试验结果表明,该多重RT-PCR方法对PEDV、TGEV和PRV的最低检出量分别为3.3×103拷贝/μL、3.2×103拷贝/μL和2.8×103拷贝/μL。利用建立的多重RT-PCR检测方法和单项RT-PCR对20份临床病料进行检测,结果显示,两者的总符合率为100%。结果表明建立的多重RT-PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点,可以用于这3种病毒的同时检测和疾病的鉴别诊断。
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关 键 词: | 多重聚合酶链式反应 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪轮状病毒 |
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