| 5种人兽共患病病毒多重RT-PCR检测方法的初步建立 |
| |
| 引用本文： | 孙庆歌,步志高,吴东来,杨银辉,张维军,王群,康晓平,李永强,白宇,童铁钢,杨涛.5种人兽共患病病毒多重RT-PCR检测方法的初步建立[J].中国预防兽医学报,2009,31(10). |
| |
| 作者姓名： | 孙庆歌 步志高 吴东来 杨银辉 张维军 王群 康晓平 李永强 白宇 童铁钢 杨涛 |
| |
| 作者单位： | 孙庆歌,步志高,吴东来,张维军,王群,白宇,童铁钢,杨涛(中国农业科学院哈尔滨兽疾研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001);杨银辉,康晓平,李永强(军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物/生物安全国家重点实验室,北京,100071) |
| |
| 摘 要： | 为建立可同时检测裂谷热病毒(RVFV)、戊型肝炎病毒(HEV)、狂犬病毒(RV)、水泡性口炎病毒(VSV)及口蹄疫病毒(FMOV)5种人兽共患病病毒的多重RT-PCR快速检测方法,本研究根据GenBank登录的上述5种病毒的全基因组序列,设计了5对多重PCR引物,通过优化反应条件,建立检测以上5种病毒的多重RT-PCR方法.通过对同一种属的其他病毒及相关病毒的检测,确定方法的特异性;通过对体外转录合成的RNA进行定量检测的方法,确定方法的敏感度.实验结果表明:在同一RT-PCR反应体系中可同时检测以上5种病毒,扩增片段长度分别为499 bp、137 bp、274 bp、224 bp、389 bp;而对新城疫病毒(NDV)、赤羽病病毒(AKAV)、牛流行热病毒(BEFV)和乙型脑炎病毒(JBEV)的检测均为阴性;5种病毒RNA的最低检测拷贝数分别为2.91×104、3.14×1 03、1.25×103、6.65×103和2.38×104.利用该方法对11份RV已知阳性样本和7份HEV已知阳性样本检测结果均呈阳性.本研究建立了一种快速、可同时检测5种人兽共患病病毒的多重RT-PCR检测方法,该方法具有良好的特异性和较高的敏感性.
|
| 关 键 词： | 裂谷热病毒 戊型肝炎病毒 狂犬病毒 水泡性口炎病毒 口蹄疫病毒 多重RT-PCR |
Establishment of multiplex RT-PCR for the detection of five zoonosis viruses |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
