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猪流感病毒M基因实时荧光定量PCR诊断方法的建立
引用本文:张春明,乔传玲,陈艳,杨焕良,辛晓光,陈化兰,冉多良.猪流感病毒M基因实时荧光定量PCR诊断方法的建立[J].中国预防兽医学报,2008,30(10).
作者姓名:张春明  乔传玲  陈艳  杨焕良  辛晓光  陈化兰  冉多良
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;新疆农业大学动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 新疆农业大学动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052
摘    要:根据猪流感病毒(SIV)M基因的保守序列,设计并合成一对特异性引物和Taq Man MGB探针,建立了SIV M基因实时荧光定量PCR检测方法.使用含有M基因的重组质粒pMD-M作为标准品绘制标准曲线.其相关系数为0.999,检测结果表明:该方法的敏感性可达到1个EID50,组间与组内重复试验变异系数分别为0.21%和0.65%,除SIV外,其他5种猪病病毒检测均为阴性,样品检测与病毒滴定及病毒分离结果的符合率均达到100%,该方法特异性强、重复性好,有望成为SIV的一种特异、敏感、快速的定量检测方法.

关 键 词:Taq  Man  MGB探针  实时荧光定量PCR

Development of real-time fluorescent quantitative PCR for detection of M gene of swine influenza viruses
ZHANG Chun-ming,QIAO Chuan-ling,CHEN Yan,YANG Huan-liang,XIN Xiao-guang,CHEN Hua-lan,RAN Duo-liang.Development of real-time fluorescent quantitative PCR for detection of M gene of swine influenza viruses[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(10).
Authors:ZHANG Chun-ming  QIAO Chuan-ling  CHEN Yan  YANG Huan-liang  XIN Xiao-guang  CHEN Hua-lan  RAN Duo-liang
Abstract:
Keywords:SIV
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