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检测肠炎沙门氏菌ELISA方法的建立与应用研究
引用本文:黄素珍,杜元钊,张艳红.检测肠炎沙门氏菌ELISA方法的建立与应用研究[J].中国预防兽医学报,2006,28(2):196-200.
作者姓名:黄素珍  杜元钊  张艳红
作者单位:1. 山西农业大学,山西,太谷,030801
2. 农业部动物检疫所,山东,青岛
摘    要:从已建立的抗沙门氏茵单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3—47—26单抗.采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3—47—26单抗.改进用辣根过氧化物酶标记高效价单抗的方法,进行了HRP标记单抗的免疫生物学特性的鉴定。确定了包被浓度和酶标抗体的工作浓度:HRP-3—47—26为1:100;LPS的包被浓度为400ng/mL。试验中采用LPS与多聚赖氨酸的结合,解决了包被过程中的解吸附作用,增强了包被的稳定性,同时也减少了假阳性反应,优化了包被过程。建立了检测肠炎沙门氏菌的抗原竞争ELISA方法,利用样品中的LPS抑制酶标抗体与包被的LPS结合,以降低底物反应的颜色从而达到检测的目的。通过对210份肠炎沙门氏菌感染鸡泄殖腔棉拭子、羽毛和组织样品先筛选后鉴定的方法进行检测具有明显的抑制作用,通过与国标法对大量的样品检测结果比较表明,竞争ELISA方法的检出率为18.09%;检出阳性样品36份,国标法检出率为17.14%;两者符合率为97.14%。竞争ELISA敏感性和特异性分别为94.4%和97.7‰从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种敏感、特异的检测方法。

关 键 词:肠炎沙门氏菌  单抗  检测
文章编号:1008-0589(2006)02-0196-05
收稿时间:2004-09-03
修稿时间:2004年9月3日

Establishment and application of ELISA method for detecting Salmonella SPP.
HUANG Su-zhen,DU Yuan-zhao,ZHANG Yan-hong.Establishment and application of ELISA method for detecting Salmonella SPP.[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2006,28(2):196-200.
Authors:HUANG Su-zhen  DU Yuan-zhao  ZHANG Yan-hong
Abstract:
Keywords:Samonella enteritidis  monoclonal antibody  detection
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