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PRRSV NSP2基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定
引用本文:宋艳华,王海燕,李文良,李军星,李玉峰,王先炜,姜平.PRRSV NSP2基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定[J].中国预防兽医学报,2009,31(7).
作者姓名:宋艳华  王海燕  李文良  李军星  李玉峰  王先炜  姜平
作者单位:南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095
基金项目:国家自然科学基金,国家科技支撑计划,江苏省科技攻关项目,教育部博士点基金项目 
摘    要:为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白2(NSP2)之间的差异和生物学特性,本研究根据PRRSV、S1、SY0608株NSP2基因序列保守区设计引物,通过RT-PCR扩增出两毒株的NSP2基因,克隆到pFastBacTM HTB杆状病毒载体中,将筛选的阳性重组载体pF-SI-NSP2和pF-SY-NSP2,分别转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态大肠杆菌中,经蓝白菌落筛选和PCR鉴定,获得重组表达载体rBac-S1-NSP2和rBac-SY-NSP2.在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rAc-S1-NSP2和rAe-SY-NSP2,Westernblot和间接免疫荧光实验结果表明,本研究成功构建了表达PRRSV S1和SY0608株NSP2蛋白的重组杆状病毒,表达的蛋白与自然感染PRRSV的猪血清均具有良好的反应原性,为进一步研究NSP2蛋白的功能及生物学和免疫学特性奠定了基础.

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  杆状病毒

Expression and identification of NSP2 of PRRSV in recombinant baculovirus
SONG Yan-hua,WANG Hai-yan,LI Wen-liang,LI Jun-xing,LI Yu-feng,WANG Xian-wei,JIANG Ping.Expression and identification of NSP2 of PRRSV in recombinant baculovirus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(7).
Authors:SONG Yan-hua  WANG Hai-yan  LI Wen-liang  LI Jun-xing  LI Yu-feng  WANG Xian-wei  JIANG Ping
Abstract:
Keywords:NSP2
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