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| 大肠杆菌不耐热肠毒素突变体的表达及活性研究 | |
| 引用本文： | 赵艳敏,刘惠莉,邢继兰,潘洁,曹祥荣.大肠杆菌不耐热肠毒素突变体的表达及活性研究[J].中国预防兽医学报,2008,30(1):30-34,52. |
| 作者姓名： | 赵艳敏 刘惠莉 邢继兰 潘洁 曹祥荣 |
| 作者单位： | 1. 南京师范大学,生命科学学院,江苏,南京,210097;上海农业科学院,畜牧兽医研究所,上海,201106 2. 上海农业科学院,畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106 3. 南京师范大学,生命科学学院,江苏,南京,210097 |
| 基金项目： | 基金项目：上海市科技兴农重点攻关项目[2005攻字（10-1）] |
| 摘 要： | 利用重叠延伸PCR扩增技术，体外获得大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）突变体LTK63、LTR72和LTG192全基因片段，酶切和测序结果表明构建的表达载体pET30a-LT、pET30a-LTK63、pET30a-LTR72、pET30a-LTG192阅读框架正确，且相应位点氨基酸获得了替换。诱导表达产物用SDS-PAGE检测，野生型LT蛋白及3个突变体均表达出约33．0Ku和13．0Ku的2个蛋白带，与LTA、LTB亚基分子量大小相吻合；Westernblot检测，2个蛋白带均可与抗His抗体发生特异性免疫反应，而13．0Ku的蛋白带还可与抗霍乱毒素（cT）抗体发生免疫学反应。ADP-核糖转移酶活性试验分析，各突变体蛋白酶活性均低于野生型LT蛋白，但仍保留一些酶活性。Patent-mouse毒性试验检测，LTK63、LTR72和LTG192突变体蛋白的毒性均有不同程度降低，LTK63毒性降低最显著,TJTG192蛋白毒性相对较大。 |
| 关 键 词： | 大肠杆菌不耐热肠毒素 突变体 表达 大肠杆菌 不耐热肠毒素 突变体蛋白 表达 活性研究 proteins mutants enterotoxin Escherichia coli 程度 试验检测 毒性 试验分析 酶活性 转移 核糖 免疫反应 免疫学 霍乱毒素 发生 |
| 文章编号： | 1008-0589（2008）01-0030-05 |
| 收稿时间： | 2007-03-15 |
| 修稿时间： | 2007年3月15日 |
Expression and bio-activity of Escherichia coli heat-labile enterotoxin mutants proteins |
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| ZHAO Yan-min,LIU Hui-li,XING Ji-lan,PAN Jie,CAO Xiang-rong.Expression and bio-activity of Escherichia coli heat-labile enterotoxin mutants proteins[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(1):30-34,52. | |
| Authors: | ZHAO Yan-min LIU Hui-li XING Ji-lan PAN Jie CAO Xiang-rong |
| Abstract: | |
| Keywords: | heat-labile enterotoxin mutants expression |
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