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胸膜莫肺炎放线杆菌APXIV部分基因片段的表达及纯化
引用本文:刘珊珊,陈征,刘健,王新波,罗满林.胸膜莫肺炎放线杆菌APXIV部分基因片段的表达及纯化[J].中国动物检疫,2009,26(7):33-36.
作者姓名:刘珊珊  陈征  刘健  王新波  罗满林
作者单位:1. 华南农业大学兽医学院,国家重点学科预防兽医学家畜传染病实验室,广东广州,510642;莱芜市畜牧办公室动物疫病预防与控制中心,山东莱芜271100
2. 中国兽医药品监察所,北京,100081
3. 莱芜市畜牧办公室动物疫病预防与控制中心,山东莱芜,271100
摘    要:参照GenBank中已发表的ApxIV基因序列,以自行分离的App DNA为模板,利用PCR方法扩增出ApxIV3'端,大小为552bp的保守基因序列.将PCR产物克隆到pMD18-T Simple Vector中,获得重组质粒pMD-ApxIV,对其重组质粒pMD-ApxIV进行BamHI、HindIII双酶切,并将酶切产物克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建了重组表达质粒pET-ApxIV.将表达质粒转化至大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明pET-ApxIV在BL21中成功表达,并能被App阳性血清所识别,具有良好的免疫原性.表达蛋白的分子质量约为39.5KDa.利用HiTrap FF crude columns将表达的蛋白进行了纯化.

关 键 词:克隆  表达  纯化

Expression and Purification of Part ApxIV Genetic Fragment of Actinobacillus Pleuropneumoniae
Liu Shanshan,Chen Zheng,Liu Jian,Wang Xinbo,Luo Manlin.Expression and Purification of Part ApxIV Genetic Fragment of Actinobacillus Pleuropneumoniae[J].China Journal Of Animal Quarantine,2009,26(7):33-36.
Authors:Liu Shanshan  Chen Zheng  Liu Jian  Wang Xinbo  Luo Manlin
Abstract:
Keywords:APP  APXIV
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