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犬源伪狂犬病病毒的分离鉴定及其主要毒力基因分子特征分析
引用本文:吴发兴,邹敏,董雅琴,刘爽,李晓成.犬源伪狂犬病病毒的分离鉴定及其主要毒力基因分子特征分析[J].中国动物检疫,2017,34(9):96-101.
作者姓名:吴发兴  邹敏  董雅琴  刘爽  李晓成
基金项目:科技部科技基础性工作专项(2012FY111000)
摘    要:对发生临床疑似伪狂犬病毒(PRV)感染的牧羊犬组织样品,进行研磨、细胞接种、传代培养、细胞病变效应(CPE)观察、PCR检测、效价测定、电镜观察、IFA检测、家兔接种以及基因测序分析等,结果成功分离到1株犬源PRV毒株,命名为XJ-14株。该毒株可致PK-15细胞产生变圆、破碎、逐渐呈拉网式漂浮等特征性细胞病变;PRV gE-PCR检测阳性,病毒效价达10~(-7.45)/0.1 mL;病毒粒子在电镜下呈圆形,有囊膜,直径约150 nm;PRV荧光抗体检测阳性,接种家兔后可致家兔奇痒、麻痹死亡。对该毒株gC、gE、TK基因进行全基因测序,发现gE糖蛋白的48、497位各插入了1个D,另有12个氨基酸位点发生点突变,其gC蛋白氨基酸序列64~70位出现了7个氨基酸(AASTPAA)插入。结果表明,此牧羊犬病例是由PRV感染所致。

关 键 词:  伪狂犬病病毒  XJ-14株  分离鉴定  毒力基因
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