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禽肾炎病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立
引用本文:张艳芳,谢芝勋,邓显文,谢志勤,张民秀,罗思思,谢丽基,范晴,曾婷婷,黄娇玲,刘加波.禽肾炎病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立[J].中国动物检疫,2019,36(12):58-62.
作者姓名:张艳芳  谢芝勋  邓显文  谢志勤  张民秀  罗思思  谢丽基  范晴  曾婷婷  黄娇玲  刘加波
基金项目:广西科技项目(AD17195083,AA17204057);广西“八桂学者”专项(2019-79);国家“万人计划”领军人才专项(W02060083)
摘    要:为了同时检测禽肾炎病毒(avian nephritis virus,ANV)和鸡细小病毒(chicken parvovirus,ChPV),根据GenBank中ANV的ORF基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为511 bp和242 bp的特异性引物,通过反应条件优化、特异性和敏感性试验,建立了一种双重PCR检测方法。该方法最佳引物比例为ANV上下引物各0.4μL(20 mol/L),ChPV上下引物各0.6μL(20 mol/L);最佳退火温度为53.8℃;灵敏度可达到55 fg(ANV)和58 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性。本研究建立的PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定的优点,可用于同时鉴别诊断ANV和ChPV的混合感染。

关 键 词:禽肾炎病毒  鸡细小病毒  多重PCR  特异性  敏感性

Establishment of a Duplex PCR Assay for Detection of Avian Nephritis Virus and Chicken Parvovirus
Zhang Yanfang,Xie Zhixun,Deng Xianwen,Xie Zhiqin,Zhang Minxiu,Luo Sisi,Xie Liji,Fan Qing,Zeng Tingting,Huang Jiaoling,Liu Jiabo.Establishment of a Duplex PCR Assay for Detection of Avian Nephritis Virus and Chicken Parvovirus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(12):58-62.
Authors:Zhang Yanfang  Xie Zhixun  Deng Xianwen  Xie Zhiqin  Zhang Minxiu  Luo Sisi  Xie Liji  Fan Qing  Zeng Tingting  Huang Jiaoling  Liu Jiabo
Abstract:
Keywords:
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