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禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用
引用本文:乔彩霞,张鹤晓,高志强,谷强,吴丹,蒲静,郭晋优,刘继红.禽流感病毒重组核蛋白抗原的纯化及在琼脂免疫扩散试验中的应用[J].中国动物检疫,2006,23(7):32-35.
作者姓名:乔彩霞  张鹤晓  高志强  谷强  吴丹  蒲静  郭晋优  刘继红
作者单位:北京出入境检验检疫局动检中心,101113
摘    要:采用RT-PCR扩增我国H5N1禽流感病毒NP基因,亚克隆于含有组氨酸标签的原核表达载体中,在大肠杆菌中高效表达。所表达的蛋白经Ni 亲和色谱法纯化,SDS-PAGE电泳分析其纯度达95%以上,Western-Blotting鉴定具有良好的免疫反应活性。利用纯化蛋白作为诊断用抗原,建立了禽流感的琼脂扩散诊断方法。所建立的诊断方法在对禽流感强阳性和弱阳性血清的检测中,均出现了致密而清晰的沉淀线,且沉淀线的亮度与所加入的重组抗原的量成正比;而对鸡新城疫、鸡传染性法式囊等8种禽疫病阳性血清和SPF鸡血清的检测中,无沉淀线出现且没有交叉反应;利用该方法对30份进出口送检样品进行检测,其结果与国内同类试剂盒相符性达100%。实验室和现地使用证明,利用纯化的重组NP抗原所建立的方法简便、可靠、易于标准化,可为我国禽流感的兽医诊断、流行病学普查和出入境检验检疫提供有力的保障。

关 键 词:AIV  核蛋白  琼脂免疫扩散试验
文章编号:1005-944X(2006)07-0033-04

Purification of AIV Recombinant N Protein Antigen and Its Application in AGID
Qiao Caixi,Zhang Xiaohe,Gao Zhiqiang,Gu Qiang,Pu Jing,Guo Jinyou,Liu Jihong.Purification of AIV Recombinant N Protein Antigen and Its Application in AGID[J].China Journal Of Animal Quarantine,2006,23(7):32-35.
Authors:Qiao Caixi  Zhang Xiaohe  Gao Zhiqiang  Gu Qiang  Pu Jing  Guo Jinyou  Liu Jihong
Abstract:
Keywords:AIV
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