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猪血凝性脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用
引用本文:张慧,张安洁,张锋,尼博,刘爽,崔进,董雅琴,李晓成,魏荣.猪血凝性脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用[J].中国动物检疫,2020,37(8):105-109.
作者姓名:张慧  张安洁  张锋  尼博  刘爽  崔进  董雅琴  李晓成  魏荣
基金项目:国家重点研发计划项目(2017YFC1200504)
摘    要:为建立一种快速、准确、常规的猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)检测方法,根据PHEV N蛋白基因序列,设计1对引物和1条探针,建立了PHEV实时荧光RT-PCR检测方法。该方法特异性好,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV2)均无交叉反应;用阳性质粒Puc57-PHEVn评估其敏感性,发现检测下限达10~(-6) ng/μL(224拷贝/μL)。采集233份发病猪组织样品进行临床检测,发现该方法与巢式RT-PCR的符合率达98.3%,准确筛查出巢式RT-PCR并测序阳性的样品14份,且检出率高于巢式RT-PCR。结果表明,本方法敏感、特异,可用于PHEV临床样品的检测。

关 键 词:猪血凝性脑脊髓炎病毒  实时荧光RT-PCR  探针法

Establishment and Application of a Real-time RT-PCR Assay for Detection of Porcine Hemagglutinating Encephalomyelitis Virus
Zhang Hui,Zhang Anjie,Zhang Feng,Ni Bo,Liu Shuang,Cui Jin,Dong Yaqin,Li Xiaocheng,Wei Rong.Establishment and Application of a Real-time RT-PCR Assay for Detection of Porcine Hemagglutinating Encephalomyelitis Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2020,37(8):105-109.
Authors:Zhang Hui  Zhang Anjie  Zhang Feng  Ni Bo  Liu Shuang  Cui Jin  Dong Yaqin  Li Xiaocheng  Wei Rong
Abstract:
Keywords:
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