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应用荧光定量RT-PCR检测J亚群禽白血病病毒
引用本文:屈素洁,邹联斌,陈芳芳,张步娴,胡杰,莫胜兰,施开创,李军,尹彦文.应用荧光定量RT-PCR检测J亚群禽白血病病毒[J].中国动物检疫,2015,32(6):56-59.
作者姓名:屈素洁  邹联斌  陈芳芳  张步娴  胡杰  莫胜兰  施开创  李军  尹彦文
基金项目:广西区水产畜牧兽医局科技项目(桂渔牧科1204935)
摘    要:针对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)基因序列保守区域设计一对特异性引物和一条特异性探针,通过构建重组阳性标准质粒作为阳性标准品,建立了检测ALV-J核酸的荧光定量PCR方法。优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示,该检测方法特异性强,与其它禽源病毒如A亚群禽白血病病毒(ALV-A)、B亚群禽白血病病毒(ALV-B)、新城疫病毒( NDV)、禽流感病毒(AIV)、鸡传染性贫血病毒(CIAV)和马立克病病毒(MDV)均不发生交叉反应;该方法可检测到3.2×102拷贝/μL的病毒核酸,与常规RT-PCR相比,敏感性高100倍;重复性试验的变异系数小于2%。研究结果表明,建立的Real-time RT-PCR 检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好,可用于ALV-J的定量检测。

关 键 词:J亚群禽白血病病毒  Taqman  探针  荧光定量PCR

Development and Application of a Real-time RT-PCR Assay for Avian Leukosis Virus Subgroup J
Qu Sujie,Zou Lianbin,Chen Fangfang,Zhang Buxian,Hu Jie,Mo Shenglan,Shi Kaichuang,Li Jun,Yin Yanwen.Development and Application of a Real-time RT-PCR Assay for Avian Leukosis Virus Subgroup J[J].China Journal Of Animal Quarantine,2015,32(6):56-59.
Authors:Qu Sujie  Zou Lianbin  Chen Fangfang  Zhang Buxian  Hu Jie  Mo Shenglan  Shi Kaichuang  Li Jun  Yin Yanwen
Abstract:
Keywords:
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