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H5亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR方法的建立与应用
引用本文:蒋文明,李 阳,程善菊,刘华雷.H5亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR方法的建立与应用[J].中国动物检疫,2019,36(3):87-91.
作者姓名:蒋文明  李 阳  程善菊  刘华雷
作者单位:中国动物卫生与流行病学中心国家禽流感专业实验室
基金项目:国家重点研发计划项目(2017YFC120050)
摘    要:H5亚型禽流感病毒HA序列差异越来越大。为更准确地检测H5亚型禽流感病毒,对GenBank中发表的H5亚型禽流感病毒HA序列以及本实验室保存病毒序列进行比对,同时设计1对引物和1条探针,建立了H5亚型禽流感病毒实时RT-PCR方法,并对该方法的反应体系和反应参数进行了优化。以本实验室分离测序确定的30份H5亚型禽流感病毒RNA为模板,将该方法与两种商品化H5亚型禽流感病毒检测试剂盒进行比对,发现该方法与两种商品化试剂盒的检出率分别为100%、98%、98%。敏感性试验显示,该方法可以检测出0.1 fg的RNA模板,灵敏度比两种商品化试剂盒均提高了10倍。结果表明,该方法具有更高的特异性和敏感性,可用于H5亚型高致病性禽流感的早期诊断。

关 键 词:H5亚型  禽流感  实时RT-PCR  敏感性  特异性

Establishment and Application of Real-time RT-PCR for Detection of H5 Subtype Avian Influenza Virus
Jiang Wenming,Li Yang,Cheng Shanju,Liu Hualei.Establishment and Application of Real-time RT-PCR for Detection of H5 Subtype Avian Influenza Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(3):87-91.
Authors:Jiang Wenming  Li Yang  Cheng Shanju  Liu Hualei
Institution:(China Animal Health and Epidemiology Center,National Avian Influenza Specialized Laboratory,Qingdao,Shandong 266032,China)
Abstract:Jiang Wenming;Li Yang;Cheng Shanju;Liu Hualei(China Animal Health and Epidemiology Center,National Avian Influenza Specialized Laboratory,Qingdao,Shandong 266032,China)
Keywords:H5 subtype  avian influenza  real-time RT-PCR  sensitivity  specificity
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