| 牛支原体和牛病毒性腹泻病毒二重二温式PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 谢志勤,范 晴,谢芝勋,张民秀,谢丽基,黄娇玲,张艳芳,曾婷婷,王 盛,罗思思,邓显文,李 孟,李 丹,刘加波.牛支原体和牛病毒性腹泻病毒二重二温式PCR检测方法的建立[J].中国动物检疫,2019,36(1):70-75. |
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| 作者姓名： | 谢志勤 范 晴 谢芝勋 张民秀 谢丽基 黄娇玲 张艳芳 曾婷婷 王 盛 罗思思 邓显文 李 孟 李 丹 刘加波 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 广西科技重大专项（桂科AA17204057）；广西科技重点研发计划（桂科AB16380003） |
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| 摘 要： | 为建立一种牛支原体(Mycoplasma bovis,MB)和牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的快速鉴别诊断方法,针对MB的uvr C基因和BVDV的5'端非编码区(5'-UTR)保守基因序列,分别设计两对特异引物,并将三温式PCR扩增程序简化为二个温度梯度,建立了鉴别MB和BVDV的二重二温式PCR方法。该方法能同时扩增MB和BVDV,扩增产物大小分别为412和170 bp。特异性试验结果显示,该方法对参试的所有毒株只扩增MB和BVDV基因组,对其它牛病原体无扩增;敏感性试验结果显示,该方法最低能同时检测到104拷贝的两种目的核酸;干扰性试验结果显示,该方法能同时检测两个模板不同浓度的组合,试验结果不受模板影响。综上,本研究所建立的二重二温式PCR方法特异、敏感、快速、简便,可应用于MB和BVDV临床鉴别诊断和流行病学调查。
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| 关 键 词： | 二重二温式PCR 牛支原体 牛病毒性腹泻病毒 检测 |
Development of Two-temperature Duplex PCR for Detection of Mycoplasma bovis and Bovine Viral Diarrhea Virus |
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| Xie Zhiqin,Fan Qing,Xie Zhixun,Zhang Minxiu,Xie Liji,Huang Jiaoling,Zhang Yanfang,Zeng Tingting,Wang Sheng,Luo Sisi,Deng Xianwen,Li Meng,Li Dan,Liu Jiabo.Development of Two-temperature Duplex PCR for Detection of Mycoplasma bovis and Bovine Viral Diarrhea Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(1):70-75. |
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| Authors: | Xie Zhiqin Fan Qing Xie Zhixun Zhang Minxiu Xie Liji Huang Jiaoling Zhang Yanfang Zeng Tingting Wang Sheng Luo Sisi Deng Xianwen Li Meng Li Dan Liu Jiabo |
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| Institution: | (Guangxi Veterinary Research Institute,Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Nanning,Guangxi 530001,China) |
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| Abstract: | Xie Zhiqin;Fan Qing;Xie Zhixun;Zhang Minxiu;Xie Liji;Huang Jiaoling;Zhang Yanfang;Zeng Tingting;Wang Sheng;Luo Sisi;Deng Xianwen;Li Meng;Li Dan;Liu Jiabo(Guangxi Veterinary Research Institute,Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Nanning,Guangxi 530001,China) |
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| Keywords: | two-temperature duplex PCR Mycoplasma bovis bovine viral diarrhea virus detection |
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