一步法RT—PCR检测大缸奶在BVDV清除计划中的应用

本文利用一步法RT—PCR对28个牛场共计50份大缸奶样进行了BVDV核酸检测。在与全群抗原检测结果对比后发现．9个已知存有PI牛的泌乳牛群，其大缸奶核酸检测均为阳性，其余41个已知无PI牛的泌乳牛群．除1个因为存在急性感染牛造成阳性结果外，其余40个均为阴性。由此可见，本方法对与泌乳牛群内是否存在PI牛可以做出准确判断，其检测灵敏度和特异性均为100％，阳性预测结果可信度为0．9（9／10），阴性预测结果可信度为0．98（40／41）。此外．针对50个大缸奶样进行的抗体检测表明，对于已感染牛场，泌乳牛群是否存在PI牛，抗体水平没有明显差异（OD1．12±0．12vsOD1．34±0．23，P〉0．05）。实验室条件下，本试验使用的RT—PCR方法对于阳性乳的最低检出限为50uL/头，因此理论上，最多可从1000份样品中检出阳性乳成分（总体积为50mL）。综上可知，本试验确立的RT—PCR方法灵敏度高、特异性强，可对泌乳牛群是否存在PI牛进行准确预测，相比大缸奶抗体检测更具实际指导意义，联合ELISA—Ag使用时还可大幅度降低泌乳牛群BVDV清除计划的检测成本，因而值得推广使用。

Application of One-step RT-PCR Used to Detect Bulk Milk in BVDV Eradication Programme