| 牛蛙(Rana catesbeiana)皮肤cDNA文库的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 赵瑞利,韩俊友,李莲瑞,乔红伟,雷连成,胡博,谢芳,刘丽凡,韩文瑜.牛蛙(Rana catesbeiana)皮肤cDNA文库的构建与鉴定[J].中国兽医学报,2008,28(4):430-433. |
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| 作者姓名： | 赵瑞利 韩俊友 李莲瑞 乔红伟 雷连成 胡博 谢芳 刘丽凡 韩文瑜 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
2. 中国医学科学院协和医科大学,实验动物研究所,北京,100021 |
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| 摘 要： | 以牛蛙皮肤组织为材料获得总RNA,用偶联Oligo(dT)的磁珠纯化mRNA后,利用含Sfi Ⅰ酶切位点的CDSⅢ引物在逆转录酶的作用下合成cDNA的第1链,以含Sfi Ⅰ酶切位点的CDSⅢ引物和SMART引物,利用LD-PCR合成双链cDNA,双链cDNA经Sfi Ⅰ酶切,通过T4DNA连接酶连接到经过相同酶切的λTripIEx2载体,体外包装后转染E.coli XLI-Blue 宿主菌,进行滴度测试和文库扩增.结果构建的牛蛙皮肤cDNA 文库原始库容量为1.42×106 PFU/mL,插入片段长度在0.5～1.5 kb,重组率为89.5%,扩增后的文库滴度为1.35×109 PFU/mL,构建的文库质量符合要求,可用于大规模的功能基因分析.
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| 关 键 词： | cDNA文库 牛蛙 抗菌肽 牛蛙 蛙皮肤 文库 构建与鉴定 tissue skin cDNA library analysis 基因分析 功能 大规模 库质量 重组率 长度 插入片段 库容量 库原 结果 测试 滴度 |
| 文章编号： | 1005-4545(2008)04-0430-04 |
| 修稿时间： | 2006年11月6日 |
Construction and analysis of cDNA library of Rana catesbeiana skin tissue |
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| ZHAO Rui-li,HAN Jun-you,LI Lian-rui,QIAO Hong-wei,LEI Lian-cheng,HU Bo,XIE Fang,LIU Li-fan,HAN Wen-yu.Construction and analysis of cDNA library of Rana catesbeiana skin tissue[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(4):430-433. |
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| Authors: | ZHAO Rui-li HAN Jun-you LI Lian-rui QIAO Hong-wei LEI Lian-cheng HU Bo XIE Fang LIU Li-fan HAN Wen-yu |
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