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布鲁菌属PCR检测方法的建立与初步应用
引用本文:杜涛峰,韩文瑜,冮森林,雷连成,王大力,孙长江,李铁峰,李扬,顾敬敏.布鲁菌属PCR检测方法的建立与初步应用[J].中国兽医学报,2010,30(11).
作者姓名:杜涛峰  韩文瑜  冮森林  雷连成  王大力  孙长江  李铁峰  李扬  顾敬敏
作者单位:1. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春130062
2. 吉林省地方病第一防治研究所,吉林白城,137000
基金项目:吉林省省长基金资助项目,国家科技支撑计划资助项目
摘    要:根据GenBank中的布鲁菌属特异性基因序列BCSP31设计1对引物,以牛种布鲁菌544A、牛种布鲁菌104M、羊种布鲁菌16M和猪种布鲁菌S2基因组DNA作为模板,进行PCR扩增。优化PCR的反应条件,并对方法的特异性、敏感性及适用性进行验证。结果显示,PCR可扩增得到287 bp的目的基因条带,测序结果与已发表的序列同源性达100%。该方法对牛种布鲁菌544A的最小检出量为0.16 pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。建立的PCR方法具有快速简便、特异性强、敏感性高等特点,为布鲁菌的实验室诊断和流行病学调查奠定了基础。

关 键 词:布鲁菌  PCR  特异性  敏感性  适用性

Development and preliminary application of PCR assay for detection of Brucella genus
DU Tao-feng,HAN Wen-yu,GANG Sen-lin,LEI Lian-cheng,WANG Da-li,SUN Chang-jiang,LI Tie-feng,LI Yang,GU Jing-min.Development and preliminary application of PCR assay for detection of Brucella genus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(11).
Authors:DU Tao-feng  HAN Wen-yu  GANG Sen-lin  LEI Lian-cheng  WANG Da-li  SUN Chang-jiang  LI Tie-feng  LI Yang  GU Jing-min
Abstract:
Keywords:
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