| 猪结合珠蛋白基因的克隆、原核表达及单克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 喻翠翠,孟宪荣,栗绍文,梅仕林,张望,周蕾蕾,陈辉,毕丁仁.猪结合珠蛋白基因的克隆、原核表达及单克隆抗体制备[J].中国兽医学报,2010,30(9). |
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| 作者姓名： | 喻翠翠 孟宪荣 栗绍文 梅仕林 张望 周蕾蕾 陈辉 毕丁仁 |
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| 作者单位： | 华中农业大学,动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室,湖北,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 华中农业大学2010年新兴学科研究生教育发展项目资助 |
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| 摘 要： | 本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)制备特异性单克隆抗体.以梅山猪肝脏总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增猪hp基因,将其克隆到原核表达栽体pGEX-KG和pET-32a上,转化至E.coli BL21中,IPTG诱导下高效表达重组GST-Hp和HIS-Hp蛋白.用纯化的重组GST-Hp免疫BALB/c小鼠,用纯化的HIS-Hp作为包被抗原进行间接ELISA检测,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选阳性细胞株,制备单克隆抗体.结果表明筛选到2株高效分泌抗猪Hp单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3B4和3C8.Western-blot和间接ELISA检测均表明制备的单克隆抗体具有良好的特异性.
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| 关 键 词： | 猪 结合珠蛋白 基因克隆 原核表达 单克隆抗体 |
Gene cloning and prokaryotic expression of porcine haptoglobin and preparation of monocional antibodies |
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| YU Cui-cui,MENG Xian-rong,LI Shao-wen,MEI Shi-lin,ZHANG Wang,ZHOU Lei-lei,CHEN Hui,BI Ding-ren.Gene cloning and prokaryotic expression of porcine haptoglobin and preparation of monocional antibodies[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(9). |
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| Authors: | YU Cui-cui MENG Xian-rong LI Shao-wen MEI Shi-lin ZHANG Wang ZHOU Lei-lei CHEN Hui BI Ding-ren |
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