| 金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK的表达及其多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 李跃,宫鹏娟,夏斐斐,宋军,顾敬敏,张蕾,杨梅,孙长江,冯新,韩文瑜.金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK的表达及其多克隆抗体的制备[J].中国兽医学报,2014(1):45-49. |
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| 作者姓名： | 李跃 宫鹏娟 夏斐斐 宋军 顾敬敏 张蕾 杨梅 孙长江 冯新 韩文瑜 |
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| 作者单位： | ;1.吉林大学动物医学学院 |
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| 摘 要： | 将噬菌体与细菌孵育25min提取噬菌体感染细菌的总RNA,通过逆转录的方法获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到目的片段,以pET-15b为载体构建重组质粒pET-15b-lysK并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达金黄色葡萄球菌噬菌体K裂解酶基因lysK,表达产物蛋白经镍柱纯化后,测定LysK的裂解活性、裂解谱,并免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,成功诱导表达可溶性LysK并获得重组蛋白,酶谱试验证明LysK对金黄色葡萄球菌具有裂解活性,LysK比噬菌体K裂解谱广。制备的兔多克隆抗体能够与LysK发生特异性反应且具有较高效价,为后续进行LysK体内治疗研究打下了基础。
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| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌 噬菌体 裂解酶 多克隆抗体 |
Expression and pliyclonal antibody preparation of Staphylococcus aureus bacteriophage K lysin LysK |
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