| 猪圆环病毒2型标记毒株的构建与iDNA疫苗的初步研究 |
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| 引用本文： | 王伟丞,梁海英,曾智勇,汤德元,刘钊,代振江.猪圆环病毒2型标记毒株的构建与iDNA疫苗的初步研究[J].中国兽医学报,2015,35(5):698-703. |
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| 作者姓名： | 王伟丞 梁海英 曾智勇 汤德元 刘钊 代振江 |
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| 作者单位： | 贵州大学动物科学学院,贵州贵阳,550025 |
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| 摘 要： | 为实现携带分子标记的猪圆环病毒2型标记毒株的构建,对其进行感染性DNA(iDNA)疫苗的初步研究,即构建的感染性克隆质粒既能发挥DNA疫苗的作用,同时又能在动物机体内拯救出活病毒,发挥病毒活疫苗的作用,本研究以PCV2Cap蛋白末端具有赖氨酸延伸特征的GZ-RH1株为材料,构建该毒株的感染性克隆质粒pcDNA3.1(+)-PCV2,并在病毒基因组中引入1个SalⅠ酶切位点作为鉴别拯救病毒的分子标记。将该感染性克隆质粒转染PK-15传代细胞进行病毒拯救后,通过IPMA、PCR-RFLP以及全基因组测序等试验对拯救病毒进行检测和鉴定,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养的增殖能力。结果表明,利用构建的感染性克隆质粒拯救获得的PCV2标记毒株,经盲传10代后毒价可到105.3 TCID50/mL,分子标记能够稳定存在,该感染性克隆质粒可以应用到PCV2iDNA疫苗的初步研究中。昆明小鼠接毒试验结果表明,构建的感染性克隆质粒在小鼠体内也具有感染性,能够拯救出PCV2标记毒株,且可以诱导产生抗PCV2的抗体,与体外拯救的标记毒株免疫小鼠具有类似的体内生物学特性,表明PCV2iDNA新型疫苗构建策略是可行的。本研究为进一步研究PCV2iDNA疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 分子标记 感染性克隆 病毒拯救 iDNA疫苗 |
Construction of porcine circovirus type 2 with genetic marker and the preliminary study of iDNA vaccines |
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| WANG Wei-cheng,LIANG Hai-ying,ZENG Zhi-yong,TANG De-yuan,LIU Zhao,DAI Zhen-jiang.Construction of porcine circovirus type 2 with genetic marker and the preliminary study of iDNA vaccines[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2015,35(5):698-703. |
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| Authors: | WANG Wei-cheng LIANG Hai-ying ZENG Zhi-yong TANG De-yuan LIU Zhao DAI Zhen-jiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine circovirus type 2 molecular marker infectious clone virus rescue iDNA vaccines |
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