| H5亚型禽流感病毒的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测技术 |
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| 引用本文： | 谢青梅,曹永长,张祥斌,李少璃,冀君,马静云,毕英佐.H5亚型禽流感病毒的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测技术[J].中国兽医学报,2010,30(1). |
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| 作者姓名： | 谢青梅 曹永长 张祥斌 李少璃 冀君 马静云 毕英佐 |
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| 作者单位： | 1. 华南农业大学动物科学学院,广东广州,510642
2. 中山大学生命科学学院,广东,广州,510275 |
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| 基金项目： | 广东省重大科技专项项目 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中H5N1亚型流感病毒HA基因保守区的序列,设计1组对应HA序列6个区域的4条特异性引物进行核酸扩增,建立RT-LAMP反应体系,优化LAMP反应条件,最佳等温扩增反应条件为65℃保温60min。扩增后产物加入核酸染色剂SYBRⅠ和4 mmol/L Mg2+,结果可视。扩增产物可用特异性内切酶KpnⅠ进行酶切鉴定。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品,检测结果与RT-PCR方法一致。RT-LAMP技术整个检测过程只需1~2 h,不需要PCR仪和成像系统,仅需要一恒温水浴锅即可完成试验。通过特异性、敏感性试验,验证了建立的RT-LAMP技术可以作为一种操作简单,灵敏性、特异性高的检测H5亚型禽流感病毒的方法。
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| 关 键 词： | H5亚型禽流感病毒 HA RT-LAMP |
Rapid diagnosis of H5 subtype avian influenza virus by RT-loop-mediated isothermal amplification |
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| XIE Qing-mei,CAO Yong-chang,ZHANG Xiang-bin,LI Shao-li,JI Jun,MA Jing-yun,BI Ying-zuo.Rapid diagnosis of H5 subtype avian influenza virus by RT-loop-mediated isothermal amplification[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(1). |
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| Authors: | XIE Qing-mei CAO Yong-chang ZHANG Xiang-bin LI Shao-li JI Jun MA Jing-yun BI Ying-zuo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | H5 subtype avian influenza virus HA RT-LAMP |
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