| 表达PEDV中国变异株S基因重组猪伪狂犬病病毒的构建和纯化 |
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| 引用本文： | 杨盼盼,吴艳阳,杨东东,高冬生,王川庆,赵军,李存法.表达PEDV中国变异株S基因重组猪伪狂犬病病毒的构建和纯化[J].中国兽医学报,2018(6). |
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| 作者姓名： | 杨盼盼 吴艳阳 杨东东 高冬生 王川庆 赵军 李存法 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院;河南牧业经济学院制药工程学院 |
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| 摘 要： | 为了研制出能够同时预防猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染的二联活疫苗,本研究将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和PEDV中国变异株的纤突蛋白免疫决定簇区域(S1)基因分别克隆至含有PRV胸苷激酶(TK)基因上、下游同源臂的穿梭载体pTK中,构建重组PRV转移质粒pTK-EGFP和pTK-S1。将重组质粒pTK-EGFP与PRV疫苗毒株Bartha-K61基因组DNA共转染Vero细胞,经绿色荧光蚀斑纯化得到重组病毒rPRV-EGFP。随后将重组质粒pTK-S1与rPRV-EGFP基因组DNA共转染Vero细胞,通过反向筛选EGFP阴性蚀斑,蚀斑纯化得到表达PEDV S蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-S1。本研究将为更有效防控猪伪狂犬病和猪流行性腹泻提供辅助工具。
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