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| 堆型艾美耳球虫单链抗体-PE40重组免疫毒素的构建 | |
| 引用本文： | 顾小龙,秦建华,赵月兰,左玉柱,康桂英,包永占,刘红彬.堆型艾美耳球虫单链抗体-PE40重组免疫毒素的构建[J].中国兽医学报,2008,28(7). |
| 作者姓名： | 顾小龙 秦建华 赵月兰 左玉柱 康桂英 包永占 刘红彬 |
| 作者单位： | 1. 河北农业大学,动物科技学院,河北保定,071000;河北北方学院,动物科技学院,河北,张家口,075000 2. 河北农业大学,动物科技学院,河北保定,071000 3. 河北北方学院,动物科技学院,河北,张家口,075000 4. 内蒙古民族大学动物科技学院,内蒙古,通辽,028000 |
| 摘 要： | 用HindⅢ对已构建的质粒pT-PE40和原核表达载体pET22-ScFv进行单酶切,回收纯化1 101 bp的PE40基因片段并将其亚克隆至pET22-ScFv载体中,构建重组免疫毒素表达质粒pET22-ScFv-PE40。将该质粒转化入感受态大肠杆菌J M109中增殖,提取质粒后用SalⅠ和NotⅠ进行双酶切鉴定,得到了1 114 bp和6 181 bp目的基因片段。测序鉴定PE40的插入方向,选取以PE40基因5′端与ScFv基因3′端连接的重组质粒,构建了抗堆型艾美耳球虫重组免疫毒素质粒pET22-ScFv-PE40。抗堆型艾美耳球虫重组质粒pET22-ScFv-PE40经1 mmol/LIPTG诱导,在大肠杆菌中表达约68 000的目的蛋白。使用抗PE多克隆抗体对目的蛋白进行蛋白印迹分析,结果表达产物与抗PE多克隆抗体发生抗原抗体反应,证明融合基因得到表达。 |
| 关 键 词： | 堆型艾美耳球虫 单链抗体 PE40 重组免疫毒素 堆型艾美耳球虫 单链抗体 重组免疫毒素 acervulina Eimeria immunotoxin recombinant 融合基因 抗体反应 抗原 发生 结果表达 印迹分析 多克隆抗体 使用 蛋白 大肠杆菌 毒素质粒 重组质粒 连接 |
Construction of ScFv-PE40 recombinant immunotoxin against Eimeria acervulina |
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| GU Xiao-long,QIN Jian-hua,ZHAO Yue-lan,ZUO Yu-zhu,KANG Gui-ying,BAO Yong-zhan,LIU Hong-bin.Construction of ScFv-PE40 recombinant immunotoxin against Eimeria acervulina[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(7). | |
| Authors: | GU Xiao-long QIN Jian-hua ZHAO Yue-lan ZUO Yu-zhu KANG Gui-ying BAO Yong-zhan LIU Hong-bin |
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