| 3株致病性鸡大肠杆菌P型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析 |
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| 引用本文： | 苗玉和,王文成,张贵刚.3株致病性鸡大肠杆菌P型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析[J].中国兽医学报,2005,25(3):250-252. |
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| 作者姓名： | 苗玉和 王文成 张贵刚 |
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| 作者单位： | 辽宁省益康生物制品厂,辽宁,辽阳,111000 |
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| 摘 要： | 用鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA做为模板，PCR分别扩增出了0．55kb的P型菌毛结构基因(papA)。将扩增得到的3个papA基因片段分别克隆进pGEM—T栽体中，转化至受体菌JM109中，用Amp／IPTG／X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法，得到含阳性重组子的菌株，提取质粒后用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切进行鉴定。所得阳性重组子进行DNA序列测定，测序结果经DNA Star核酸分析软件包分析比较，结果表明，所构建的克隆质粒中均含有相应完整papA基因，其开放式阅读框架大小为549bp，编码182个氨基酸。此3株菌的P型菌毛结构基因的同源性为98.9％～100％，其中O1株和O78株的P型菌毛基因的ORF序列100％相同，O2株有2个碱基与前两者不同。
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| 关 键 词： | 结构基因 P型菌毛 鸡大肠杆菌 同源性分析 克隆 鸡致病性大肠杆菌 DNA序列测定 基因组DNA 分析软件包 基因片段 琼脂平板 IPTG 分析比较 Star 菌毛基因 重组子 分离株 PCR 受体菌 筛选法 Amp Sal 双酶切 开放式 氨基酸 |
| 文章编号： | 1005-4545(2005)03-0250-03 |
| 修稿时间： | 2004年2月13日 |
Cloning and Sequence Analysis of Type P Pilin Structural Gene in Pathogenic Escherichia coli from Chichen |
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| MIAO Yu-he,WANG Wen-cheng,ZHANG Gui-gang.Cloning and Sequence Analysis of Type P Pilin Structural Gene in Pathogenic Escherichia coli from Chichen[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2005,25(3):250-252. |
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| Authors: | MIAO Yu-he WANG Wen-cheng ZHANG Gui-gang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chicken pathogenic Escherichia coli type P pilin TA cloning sequencing homology |
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