| 鸡白细胞介素-6原核表达及双抗夹心ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 李卫,彭俊平,谷长勤,胡薛英,张万坡,程国富.鸡白细胞介素-6原核表达及双抗夹心ELISA方法的建立[J].中国兽医学报,2011,31(11). |
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| 作者姓名： | 李卫 彭俊平 谷长勤 胡薛英 张万坡 程国富 |
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| 作者单位： | 1. 华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070／信阳高等农业专科学校动物科学系,河南信阳464000
2. 华中农业大学动物医学院,湖北武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30972161); 湖北省科技攻关课题(2006AA202A05) |
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| 摘 要： | 应用分子生物学技术原核表达ChIL-6，以ChIL-6重组蛋白为免疫原，按免疫程序分别制备兔抗和鼠抗IL-6重组蛋白的多克隆抗体。应用此抗体建立双抗夹心EL-ISA方法后，为了优化此方法本试验对该方法的最佳试验条件、标准曲线、重复性和初步应用进行确定。结果显示，经SDS-PAGE和Western-blot分析，表明ChIL-6在大肠杆菌中正确表达，为了建立检测ChIL6的双抗夹心ELISA方法，本试验应用表达的重组蛋白制备兔抗和鼠抗多克隆抗体。建立的双抗夹心ELISA方法最佳反应条件为包被抗体的质量浓度为50mg／L，4℃过夜；酶标二抗稀释度为1：400，37。C1h；应用该方法检测感染金黄色葡萄球菌后的ChIL-6，其结果与本实验室之前应用人的ELISA试剂盒检测的结果相似。结果表明，本试验建立的检测ChlL-6的双抗夹心ELISA方法可用于临床。
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| 关 键 词： | 鸡白细胞介素-6 原核表达 双抗夹心ELISA |
Prokaryotic expression of chicken interleukin-6 gene and establishment of double sandwich ELISA |
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| LI Wei,PENG Jun-ping,GU Chang-qin,HU Xue-ying,ZHANG Wan-po,CHENG Guo-fu.Prokaryotic expression of chicken interleukin-6 gene and establishment of double sandwich ELISA[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(11). |
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| Authors: | LI Wei PENG Jun-ping GU Chang-qin HU Xue-ying ZHANG Wan-po CHENG Guo-fu |
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| Institution: | LI Wei1,2,PENG Jun-ping1,GU Chang-qin1,HU Xue-ying1,ZHANG Wan-po1,CHENG Guo-fu1(1.College of Veterinary Medicine,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China,2.Animal Scientific Department,Xinyang Agricultural College,Xinyang,Henan 464000,China) |
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| Abstract: | The study appled ChIL-6 recombinant protein to prepare polyclonal antibodies of rabbit anti-ChIL-6 and mouse anti-ChIL-6,established double-antibody sandwich ELISA method though application of two antibodies,determined the best experimental conditions,standard curve,repeatability and preliminary applications of the method.SDS-PAGE and Western-blot of the recombinant protein showed that ChIL-6 gene was expressed in E.coli successfully.The recombinated protein was applied to immunize rabbit and BALB/c for ser... |
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| Keywords: | chicken interleukin-6 prokaryotic expression double sandwich ELISA |
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