猪精子与慢病毒作用机制的探讨 |
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引用本文: | 周均云,习欠云,关立增,等.猪精子与慢病毒作用机制的探讨[J].中国兽医学报,2014(4):658-663. |
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作者姓名: | 周均云 习欠云 关立增 等 |
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作者单位: | ;1.华南农业大学动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心;2.延边大学农学院动物科学学院 |
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摘 要: | 在制备转基因动物的方法中,精子载体法(与质粒结合)因操作简单而备受关注,但整合效率低,遗传稳定性较差,而慢病毒载体具有良好的感染效率和整合效果,慢病毒与精子孵育制备转基因动物是转基因方法的有益尝试。本研究采用这一新方法成功制备出转基因猪。为了探索精子与慢病毒的相互作用机制,首先制备慢病毒,经梯度稀释法测定其滴度为1.2×105 ifu/mL。然后,用DNA酶消化去除慢病毒液中载体质粒,将慢病毒液与精子在17℃下共孵育2h后,再用RNA酶消化慢病毒颗粒,对精子进行RT-PCR、PCR和FISH检测。结果提示,慢病毒颗粒可能进入精子中。该发现为这一转基因新方法的建立提供了理论依据。
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关 键 词: | 精子 转基因猪 慢病毒 作用机制 |
Mechanism exploration of interaction of porcine sperm and lentivirus |
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