| H3N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 张博,郭万柱,徐志文,王印,朱玲,孙志勇,王小玉.H3N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立[J].中国兽医学报,2011,31(3). |
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| 作者姓名： | 张博 郭万柱 徐志文 王印 朱玲 孙志勇 王小玉 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物医学学院动物生物技术中心,四川雅安,625014 |
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| 基金项目： | "教育部长江学者和创新团队发展计划"资助项目，国家"十一五"科技支撑计划资助项目 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法成功扩增了H3N2亚型猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)四川分离株(A/Swine/Sichuan/01/2006)的NS1基因,将其克隆于原核表达载体pET-32a(+)中,构建了重组质粒pET32-NS1.将该质粒转化进大肠杆菌RosettaTM,经终浓度为0.5 mmol/L的IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE电泳表明融合的NS1蛋白得到了大量的表达,该融合蛋白的相对分子质量约为43 500.Western-blotting结果显示该蛋白能与阳性血清发生特异性反应具有很好的免疫反应原性.结果表明,所建立的ELISA方法与几种常见猪群传染病病原无交叉反应,具有较好的特异性、敏感性和重复性,可进一步优化应用于临床SIV的检测.
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| 关 键 词： | 猪流感病毒H3N2亚型 NS1基因 原核表达 间接ELISA |
Cloning and expression of swine influenza virus subtype H3N2 and establishment of an indirect ELISA |
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| ZHANG Bo,GUO Wan-zhu,XU Zhi-wen,WANG Yin,ZHU Ling,SUN Zhi-yong,WANG Xiao-yu.Cloning and expression of swine influenza virus subtype H3N2 and establishment of an indirect ELISA[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(3). |
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| Authors: | ZHANG Bo GUO Wan-zhu XU Zhi-wen WANG Yin ZHU Ling SUN Zhi-yong WANG Xiao-yu |
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