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猪圆环病毒2型吉林地方株ORF2基因的克隆、测序及其在原核细胞中的表达
引用本文:冷雪,崔晓华,黄海龙,胡桂学.猪圆环病毒2型吉林地方株ORF2基因的克隆、测序及其在原核细胞中的表达[J].中国兽医学报,2007,27(4):469-472.
作者姓名:冷雪  崔晓华  黄海龙  胡桂学
作者单位:吉林农业大学动物科学技术学院,吉林,长春,130118
基金项目:吉林省牧业管理局科研项目;吉林农业大学校科研和教改项目
摘    要:根据GenBank中发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列,设计合成1对特异性引物,用PCR方法从接种PCV2吉林株(JL01)PK-15细胞中,扩增出PCV2毒株的ORF2基因。将扩增片段克隆于pMD18-T载体,进行序列测定。结果表明,PCV2JL01毒株的ORF2基因核苷酸长度为702bp。将重组质粒用Sal Ⅰ和Xho Ⅰ酶切后与同样处理的pET-32a载体连接,转化BL21细胞后,挑取阳性克隆。经PCR和酶切鉴定后,用IPTG诱导,细菌裂解液经SDS—PAGE和Western—blot分析,表明ORF2基因在大肠杆菌中得到了表达,并能被PCV2阳性血清所识别。

关 键 词:猪圆环病毒2型  ORF2基因  克隆  测序  表达
文章编号:1005-4545(2007)04-0469-04
修稿时间:2005-10-20

Cloning,sequencing and expression of ORF2 gene of porcine circovirus type 2 isolated from Jilin province of JL01 isolate
LENG Xue,CUI Xiao-hua,HUANG Hai-long,HU Gui-xue.Cloning,sequencing and expression of ORF2 gene of porcine circovirus type 2 isolated from Jilin province of JL01 isolate[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(4):469-472.
Authors:LENG Xue  CUI Xiao-hua  HUANG Hai-long  HU Gui-xue
Institution:College of Animal Science and Technology ,Jilin Agricultural University ,Changchun 130118 ,China
Abstract:
Keywords:PCV2  ORF2 gene  cloning  sequencing  expression
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