实时定量RT-PCR检测马动脉炎病毒 |
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引用本文: | 梁成珠,杨松,高宏伟,朱来华,蔡梅红,王谦滨,陈溥言.实时定量RT-PCR检测马动脉炎病毒[J].中国兽医学报,2005,25(2):141-144. |
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作者姓名: | 梁成珠 杨松 高宏伟 朱来华 蔡梅红 王谦滨 陈溥言 |
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作者单位: | 1. 青岛出入境检验检疫局,山东,青岛,266002;南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095 2. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095;沈阳农业大学,畜牧兽医学院,辽宁,沈阳,110161 3. 青岛出入境检验检疫局,山东,青岛,266002 4. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095 |
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基金项目: | 国家质检总局科研项目(2002IK009-03) |
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摘 要: | 选取马动脉炎病毒(EAV)基因组中高度保守的开放阅读框7(ORF7)序列,设计了特异性引物和TaqMan探针,利用一步法的实时定量RT-PCR来定量检测EAV。使用含有选定检测序列的克隆标准品做标准曲线,证明该方法可以检测出含有5(4.77)个RNA分子,即可从组织培养液(TCF)中检出一般含有5PFU/μL病毒拷贝。对猪生殖呼吸道综合征病毒、马疱疹病毒无交叉反应,特异性好。用疫苗用种毒(Bucyrus标准株)肌肉注射于马驹后,定量RT-PCR比病毒分离试验更能灵敏地检出呼吸道排出的病毒。对456份临床鼻腔分泌物样品检测,定量RT—PCR检出6份阳性,而病毒分离只检出2份阳性。一步法实时定量RT—PCR检测样品中的EAV,在快捷、准确、方便和高通量方面优于细胞培养病毒分离的检测方法,可以作为检测马病毒性动脉炎(EVA)病毒的快速方法。
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关 键 词: | 马 动脉炎病毒 实时RT-PCR TaqMan探针 定量检测 病毒性动脉炎 |
文章编号: | 1005-4545(2005)02-0141-04 |
修稿时间: | 2003年12月15 |
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