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基因芯片检测细菌耐药基因
引用本文:路浩,王兴龙,李晓艳,雷连成,鲁景艳,冯新,万家余,李忠义,杨冬.基因芯片检测细菌耐药基因[J].中国兽医学报,2008,28(2):152-156.
作者姓名:路浩  王兴龙  李晓艳  雷连成  鲁景艳  冯新  万家余  李忠义  杨冬
作者单位:1. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062
2. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062
3. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
摘    要:根据已知的耐药基因序列设计出检测四环素耐药基因特异探针7条、β-内酰胺类耐药基因特异探针5条,阳性坐标探针1条,长度为18-21 bp.根据探针序列两侧的保守区域设计了耐药基因扩增引物,引物长度17-20bp.通过荧光聚合酶链式反应,从耐药菌株中获得四环素耐药基因7个,β-内酰胺类耐药基因5个.经过芯片制作过程优化试验和芯片杂交优化试验,结果表明,将探针以终浓度30 μmol/L溶于50%DMSO中,在温度为20 C、湿度为70%的条件下点印于Aldehydeslide表面.扩增出的荧光标记产物经纯化后与2×杂交液混合,再与基因芯片在42 C杂交5 h可检测到理想的杂交信号.芯片灵敏度试验结果表明,当模板拷贝数大于1×103个/μL时,可检测到较强的杂交信号.本试验最终研制出灵敏度高、特异性强的耐药基因检测芯片.

关 键 词:检测  基因芯片  杂交  耐药基因  细菌耐药基因  芯片检测  microarrays  genes  检测芯片  拷贝数  模板  优化试验  灵敏度  杂交信号  可检测  基因芯片  混合  纯化  标记产物  表面  条件  湿度  温度  DMSO
文章编号:1005-4545(2008)02-0152-05
修稿时间:2006年5月18日

Detection of antibiotic-resistant genes by microarrays
LU Hao,WANG Xing-Long,LI Xiao-yan,LEI Lian-cheng,LU Jing-yan,FENG Xin,WAN Jia-yu,LI Zhong-yi,YANG Dong.Detection of antibiotic-resistant genes by microarrays[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(2):152-156.
Authors:LU Hao  WANG Xing-Long  LI Xiao-yan  LEI Lian-cheng  LU Jing-yan  FENG Xin  WAN Jia-yu  LI Zhong-yi  YANG Dong
Abstract:
Keywords:
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