| 猪流行性腹泻病毒S1蛋白-铁蛋白纳米颗粒的制备及其免疫原性 |
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| 引用本文： | 苏恺,王亚文,袁晨,刘志昌,徐凡,任静,张亚楠,杨柳,付利芝,宋勤叶.猪流行性腹泻病毒S1蛋白-铁蛋白纳米颗粒的制备及其免疫原性[J].中国兽医学报,2023(11):2203-2211. |
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| 作者姓名： | 苏恺 王亚文 袁晨 刘志昌 徐凡 任静 张亚楠 杨柳 付利芝 宋勤叶 |
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| 作者单位： | 1. 河北农业大学动物医学院河北省兽医生物技术创新中心;2. 河北省保定市动物疫病预防控制中心;3. 国家生猪技术创新中心 |
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| 基金项目： | 河北省高等学校科学技术研究资助项目(ZD2022145)； |
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| 摘 要： | 应用融合PCR技术获得猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)纤突(spike, S)蛋白的S1结构域基因与铁蛋白(ferritin, FTN)基因的拼接产物(S1-FTN),然后分别将S1基因和S1-FTN克隆至原核表达载体pCold 1,构建重组表达质粒pCold 1-S1和pCold 1-S1-FTN。将重组原核表达质粒分别转化大肠杆菌BL21,在低温(16℃)下用IPTG诱导重组S1蛋白和S1-FTN表达，通过SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的目的蛋白，并在透射电镜下观察蛋白的形态。随后将24只6～8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为3组：S1组、S1-FTN组和空白对照组，8只/组。每只小鼠肌肉注射40μg S1抗原，共免疫3次，分析S1-FTN纳米颗粒和S1蛋白诱导的免疫反应。结果显示，构建的原核表达载体pCold 1-S1和pCold 1-S1-FTN在低温下经IPTG诱导，能够分别表达S1蛋白和S1-FTN重组蛋白，2个蛋白均以可溶性形式表达，并且S1-FTN重组能够自组装形成纳米颗粒；S1-FTN纳...
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| 关 键 词： | PEDV S1蛋白 铁蛋白 纳米颗粒 免疫原性 |
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